بررسی دخالت در تنظیم ژنی وابسته به حدنصاب احساس در Pectobacterium atrosepticum و تغییر فعالیت LuxI و LuxR توسط ریزوباکتریهای تجزیهکننده ان-اسیلهموسرینلاکتون
نویسندگان
1 استادیار، گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد دامغان
2 دانشیار، گروه گیاهپزشکی، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
3 استادیار، گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اصفهان و قطب علمی ترانسژنز، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اصفهان (خوراسگان)، اصفهان
doi
10.22059/jbioc.2017.217827.172چکیده
سیستم حدنصاب احساس (Quorum sensing) یک سیستم ارتباطی است که به باکتریها اجازه میدهد تا تراکم جمعیتشان را از طریق تولید و ردیابی مولکولهای پیامرسان بسنجند. در باکتریهای گرم منفی این مولکولها شامل ان-اسیلهموسرینلاکتونها (AHLs) است که توسط پروتئینهای سازنده (LuxI) ساخته میشود و سپس به بیرون از سلول ترشح شده و به پروتئینهای گیرنده (LuxR) در باکتریهای مجاور متصل میشوند و رونویسی از ژنهای هدف را کم یا زیاد میکنند. تأثیر 66 ریزوباکتری تجزیهکننده AHL بر تغییر فعالیت و کارایی LuxI/LuxR و یا بازداری از سنتز AHL با استفاده از سیستم انتشار در آگار و Chromobacterium violaceum CV026 بهعنوان گزارشگر مورد ارزیابی قرار گرفت. جدایه Pectobacterium atrosepticum SRI1043 نیز بهعنوان مولد AHL استفاده شد. برای بررسی توانایی بازدارندگی از فعالیت LuxI، جدایه مولد AHL در نزدیکی باکتریهای خاموشکننده و باکتری گزارشگر دورتر از آن قرار گرفت. برای بررسی بازداری از فعالیت LuxR، جای استرینهای مولد AHL و گزارشگر عوض شد. هر دو خاصیت ممانعت از فعالیت LuxI و LuxR در 21 جدایه مشاهده شد. این جدایهها بر اساس تستهای بیوشیمیایی و بررسی توالی 16srDNA در جنسهای Bacillus، Brevundimonas، Citrobacter، Bordetella، Acinetobacter، Stenotrophomonas، Pseudomonas و Escherchia قرار گرفتند. برای بررسی دخالت در تنظیم ژنی وابسته به AHL در P. atrosepticum، باکتریهای آنتاگونیست با فاصله کمی از بیمارگر کشت شد و کاهش تولید آنزیم پروتئاز با مشاهده کاهش هاله شفاف اطراف این بیمارگر روی محیط کشت شیر خشک بدون چربی-آگار (SMA) مشخص شد. پنج جدایه تا حد زیادی تولید پروتئاز را کاهش دادند.