آنالیز کارکرد ژن Fol-SIX1 در ارقام مقاوم و حساس Cucumis melo
نویسندگان
1 جامعه المصطفی العالمیه
2 دانشگاه باقرالعلوم
3 دانشگاه پیام نور
4 دانشگاه آزاد اسلامی
doi
چکیده
ژنهای اثرگذار (effector genes) نقش کلیدی را در برهمکنش میان بیمارگر و گیاه ایفا میکنند. جستجوی همولوگ ژنهای اثرگذار از زمان گزارش تعدادی از این ژنهای در فرم اختصاصی Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol) در دیگر فرمهای اختصاصی آغاز شده است. اخیراً، با بهرهگیری از روشهای مبتنی بر بیوانفورماتیک همولوگ ژن اثرگذار Fol - SIX 1 از فرم اختصاصی Fusarium oxysporum f. sp. melonis (Fom) گزارش شدهاست. در این مطالعه آنالیز عملکرد ژن Fol-SIX1 با هدف بررسی برهمکنش این ژن با ارقام افتراقی ملون حامل ژن های مقاومت، انجام شد. توالی کدکننده ژن Fol-SIX 1 از سازه pTS1 طی سه مرحله در وکتور جفتی pCAMBIA3301 همسانهسازی شد و با استفاده از روش های کلنی PCR و هضم آنزیمی تایید گردید. صحت توالی سازه بیانی pCaS1 با توالییابی دوجهته بوسیله آغازگرهای PSh4-F2 و PSh51-Rمورد بررسی قرار گرفت. روش بیان موقت مبتنی بر تزریق اگروباکتریوم برای بیان ژن Fol-SIX 1 در برگ ارقام ملون استفاده شد. آنالیز کارکرد ژن Fol-SIX 1 با تزریق سویه LBA4404 حامل سازه بیانی pCaS1 در برگ ارقام ملون انجام شد. برگ ارقام Charentais T (Ch-T)و Charentais Fom2 (Ch-Fom2) پس گذشت 24 ساعت در ناحیه تزریق علائم سبزخشکی ناشی از مرگ سلولی در پاسخ به بیان موقت ژن Fol-SIX 1 بروز یافت در حالیکه در ارقام Charentais Fom1(Ch-Fom1) و BG5384 (BG) تا 48 ساعت پس از تزریق نیز پاسخی بروز نیافت.