کلونینگ و بیان ژن پرودی جیوسین استخراج‌شده از سراشیا مارسنس در باکتری Ecoli XL1blue

نویسندگان

1 گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران

2 گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران

doi
10.32598/JSMJ.20.2.1
چکیده

زمینه و هدف سراشیا مارسنس باکتری‌های گرم منفی هستند. امروزه رنگدانه‌ زیستی پرودی جیوسین در تهیه و تولید محصولات دارویی به‌وفور مورد استفاده قرار گرفته است و به دلیل ویژگی‌های گزارش‌شده از فعالیت‌های ضد‌قارچی، سرکوب‌کننده‌های ایمنی بدن و ضدپرولیفراسیون، یک داروی امیدوارکننده محسوب می‌شود. با تولید این رنگیزه در مقیاس وسیع توسط روش‌های مبتنی بر کلونینگ، می‌توان به کاربرد آن در داروسازی با هزینه کم و در مقیاس صنعتی امیدوار بود. در مطالعه‌ حاضر کلونینگ ژن تولید‌کننده‌ پرودی جیوسین جدا‌شده از سراشیا مارسنس (pig) در باکتری اشرشیاکلی XL1blue انجام و بیان ژن کلون‌شده در میزبان تأیید شد. همچنین خویشاوندان نزدیک باکتری مذکور جهت مطالعات آینده معرفی شدند.روش بررسی شصت نمونه از منابع بالینی بیمارستان‌های ساوه جداسازی شد. پس از تعیین هویت جدایه‌های سراشیا مارسنس، ژن pig این باکتری‌ها توسط روش کلونینگ T-A با استفاده از وکتور PTG-19 در درون میزبان اشرشیاکلی XL1blue کلون شد. بیان ژن کلون‌شده در کلونی‌های نوترکیب توسط روش Real time PCR بررسی شد. با استفاده از نرم‌افزارهای clustalX و  Mega 5درخت فیلوژنی رسم شد. یافته‌ها دوازده ایزوله‌ سراشیا مارسنس شناسایی شد که از بین آن‌ها چهار ایزوله، ژن pig را دارا بودند. بیان ژن pig در Escherichia coli XL1blue نوترکیب تولید‌شده، قابل ردیابی بود و اثبات شد. برخی خویشاوندان نزدیک سراشیا شناسایی شدند تا در مطالعات آینده کاندیدای بررسی قرار گیرد.نتیجه‌گیری سراشیا مارسنس می‌تواند منبعی غنی از رنگدانه‌ها و ردهای بومی به منظور تولید پرودی جیوسین باشد