جستجوی حاملین سالمونلا در نمونههای مدفوع گاومیشهای استان آذربایجان غربی به روش تکثیر ژن invA
doi
چکیده
مقدمه و هدف: سالمونلوزیس یکی از بیماریهای مشترک بین انسان، دام و پرندگان میباشد که توسط سروتیپهای مختلف سالمونلا ایجاد و با علائم سقط جنین، اسهال و اسهال خونی مشخص میگردد. این باکتری همچنین یکی از مهمترین گونههای باکتریایی است که از بیماریهای با منشا غذایی جدا میشود. با توجه به اهمیت بیماری در نشخوارکنندگان و همچنین اهمیت سالمونلا از لحاظ بهداشت عمومی هدف از مطالعه حاضر تعیین حاملین سالمونلا در نمونههای مدفوع گاومیشهای مناطق مختلف استان آذربایجان غربی به روش تکثیر ژن invA و مقایسه آن با روشهای معمول کشت میکروبی میباشد. مواد و روش کار: در این تحقیق 102 نمونه مدفوع از گاومیشهای مناطق مختلف استان آذربایجان غربی (ارومیه، خوی و پیرانشهر هر کدام 34 نمونه) جمعآوری شد. به منظور استخراج DNA ابتدا حدود پنج گرم از هر نمونه مدفوع در محیط غنی کننده سلنیتF براث کشت داده شد و با استفاده از روش فنل/کلروفرم/ایزوآمیل الکل استخراج DNA انجام گرفت. سپس شناسایی سالمونلا با روش PCR و با استفاده از جفت پرایمرهای اختصاصی ژن عامل تهاجم سالمونلاها (invA) به نامهای S139 و S141 انجام گرفت. همچنین به طور جداگانه 100 میکرولیتر از هر محیط سلنیتF براث بر روی محیط کشت کروم آگار سالمونلا(CAS)کشت داده شد. نتایج و بحث: از مجموع 102 نمونه مدفوع مورد مطالعه، 16 نمونه (68/15%) با استفاده از روش PCR محصول bp 662 نتیجه تکثیر ژن invA را نشان دادند که به تفکیک نواحی مورد مطالعه 4 نمونه (92/3%) از ارومیه، 6 نمونه (71/5%) از خوی و 6 نمونه (71/5%) از پیرانشهر بدست آمد، در حالیکه نتیجه کشت میکروبی برای تمامی نمونهها منفی بود. نتایج حاصل از این مطالعه نشان میدهند که آزمون PCR بسیار حساستر و اختصاصیتر از روش کشت باکتریایی جهت شناسایی سالمونلاها میباشد. همچنین دستگاه گوارش گاومیش مخزنی برای سالمونلا بوده و گاومیشها به عنوان حاملین سالمونلا در طبیعت میباشند که این موضوع از لحاظ انتقال باکتریهای بیماریزا به انسان و نیز بهداشت عمومی باید مورد توجه قرار گیرد.