ارزیابی فعالیت ضد میکروبی پرو-هپسیدین نوترکیب ماهی قرمز (Carassius auratus) علیه باکتریهای گرم مثبت و منفی
نویسندگان
1 گروه زیستشناسی، واحد قائمشهر، دانشگاه آزاد اسلامی، قائمشهر، ایران.
2 گروه زیستشناسی، واحد قائمشهر، دانشگاه آزاد اسلامی، قائمشهر، ایران.
3 گروه میکروبیولوژی، واحدآیت اللهآملی، دانشگاه آزاد اسلامی، آمل، ایران.
4 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تخصصی فناوریهای نوین آمل، آمل، ایران.
5 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تخصصی فناوریهای نوین آمل، آمل، ایران
doi
چکیده
افزایش روزافزون مقاومت آنتیبیوتیکی در باکتریهای بیماریزا، ضرورت شناسایی و توسعه ترکیبات ضدمیکروبی جایگزین را بیش از پیش آشکار ساخته است. پپتیدهای ضد میکروبی، از جمله هپسیدین، بهعنوان اجزای مهم ایمنی ذاتی مهرهداران، گزینهای امیدبخش در این زمینه محسوب میشوند. هدف از مطالعه حاضر، تولید پرو-هپسیدین نوترکیب ماهی قرمز (auratusCarassius ) و ارزیابی فعالیت ضد باکتریایی آن علیه برخی باکتریهای گرم مثبت و منفی بود. بدینمنظور، توالی کامل ژن پرو-هپسیدین استخراج، پس از بهینهسازی کدونی و الحاق برچسب هیستیدینی، در وکتور بیانی pET28a کلون و در باکتری Rosetta (BL21) Escherichia coli بیان شد. پروتئین نوترکیب پس از خالصسازی، از نظر فعالیت ضد میکروبی علیه باکتری گرم منفی (Salmonella enterica) و گرم مثبت (Staphylococcus aureus و Lactococcus garvieae) با استفاده از روش انتشار دیسک و تعیین حداقل غلظت بازدارنده (MIC) مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که پرو-هپسیدین نوترکیب دارای اثر مهاری قابل توجهی علیه هر سه باکتری است؛ حداقل دوز کشنده (MIC) مربوط به پرو-هپسیدین نوترکیب برای S. enterica، S. aureus و garvieae .L بهترتیب 50 ،25 و 25 میکروگرم بر میلی لیتر بود. همچنین، تشکیل هالههای عدم رشد معنیدار در آزمون انتشار دیسک، حتی در مواردی که باکتریها نسبت به برخی آنتیبیوتیکهای رایج مقاومت نشان دادند، بیانگر توان ضد باکتریایی بالای این پپتید بود. در مجموع، یافتههای این پژوهش نشان میدهد که پرو-هپسیدین نوترکیب ماهی قرمز از طیف وسیعی از فعالیت ضد میکروبی برخوردار است و میتواند بهعنوان یک کاندیدای بالقوه برای توسعه عوامل ضد میکروبی جدید و جایگزین آنتیبیوتیکها، بهویژه در حوزه پزشکی و آبزیپروری، مورد توجه قرار گیرد.