بررسی سه روش استخراج دی. ان. ای (DNA) از Pseudomonas aeruginosa توسط اسپکتروفوتومتر نانودراپ و ژل الکتروفورز
نویسندگان
1 دانشگاه آزاد اسلامی
2
3 دانشگاه رازی
doi
10.22051/jab.2011.3292چکیده
استخراج دی. ان. ای اولین مرحله در مطالعهی ساختار و عملکرد ژن است. در تحقیقات مهندسی ژنتیک و میکروبیولوژی، دستیابی به روش مؤثر جداسازی دی. ان. ای ضروری است. روشهای زیادی برای استخراج دی. ان. ای از باکتریها وجود دارد که بر حسب ساختار دیواره و غشای باکتری استفاده میشوند. هدف این تحقیق، ارزیابی روشهای مختلف استخراج دی. ان. ای از باکتری گرم منفی سودوموناس آئروجینوزا و انتخاب روش مؤثر بود. در این پژوهش سه روش استخراج دی. ان. ای از باکتری گرم منفی سودوموناس آئروجینوزا بهمنظور تعیین میزان کمی و کیفی دی. ان. ای و مقایسهی آنها با یکدیگر بررسی شد. این روشها شامل بافر لیز حاوی پروتئینازk،DNGTM- plus kitو جوشاندن بود. در هر روش ده نمونه در قالب طرح کاملا˝ تصادفی، انتخاب و غلظت دی. ان. ای استخراج شده با استفاده از دستگاه نانودراپ و ژل الکتروفورز آگارز اندازهگیری شد. تجزیهی واریانس تفاوت معنیداری بین این سه روش نشان داد. میانگین غلظتهای دی. ان. ای با استفاده از آزمون دانکن نیز تفاوت معنیداری نشان داد. سرانجام روش جوشاندن، مناسبترین روش با بالاترین بازده استخراج در نظر گرفته شد.
