بیان توالی کدکنندۀ پروتئین شیمریک ipaD-stxB در باکتری E. coli و کاهو

نویسندگان
چقاکبودی, زینب ID 1
عباسی, علیرضا ID 2
هنری, حسین ID 3
اٌرزاز, دیگو ID 4
ابوئی مهریزی, فریبا ID 5
علیزاده, هوشنگ ID 6

1 گروه بیوتکنولوژِی دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران

2 گروه زراعت و اصلاح نباتاتٍ دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران

3 عضو هیئت علمی دانشگاه امام حسین

4 دانشگاه پلی تکنیک والنسیا

5 دانشجوی دکتری گروه زراعت و اصلاح نباتاتٍ دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران

6 گروه زراعت و اصلاح نباتاتٍ دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران

doi
10.22059/ijfcs.2017.237642.654349
چکیده

شیگلوز، یک بیماری عفونی است که توسط شیگلا ایجاد می­شود. پروتئینIpaDیکی از مهم‌ترین عامل‌های بیماری‌زا در شیگلا است. برای تولید پروتئین نوترکیب، توالی کدکنندۀ ipaD-stxB همسانه سازی و  به ناقل بیانی pET28a(+) منتقل و توسط PCRو هضم آنزیمی تأیید شد. بیان پروتئین نوترکیب در باکتری (BL21)E. coli با SDS-PAGE، آزمون الایزا و لکه‌گذاری وسترن تأیید شد. در این تحقیق پروتئین نوترکیب حدود 54.87 درصد پروتئین کل باکتری را به خود اختصاص داد. ناقل بیانی گیاهی واجد توالی کدکنندۀ ipaD-stxB با روش Golden Braid 3.0ساخته و با کمک اگروباکتریوم سویۀ C58 در کاهو به‌صورت موقت بیان شد. بیان پروتئین نوترکیب ipaD-stxBدر سطح رونویسی (ترانسکریپتوم) با  qRT-PCRودر سطح پروتئین با آزمون الایزا تأیید شد.

کلیدواژه‌ها
ipaD, StxB, آزمون الایزا, کاهو, وسترن بلاتینگ