استفاده از تشدیدکنندۀ ترجمۀ ویروسی و سرکوبگر خاموشی ژن 2b در ساخت ناقل دوتایی برای افزایش بیان پادگن حفاظتی و عامل کشندۀ باکتری مولد سیاهزخم
نویسندگان
1 دانشیار، گروه زراعت و اصلاح نباتات، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
2 دانشیار، گروه زیستشناسی، دانشگاه امام حسین(ع)
3 استادیار، گروه زراعت و اصلاح نباتات، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
4 دانشجوی دکتری اصلاح نباتات گرایش ژنتیک مولکولی و مهندسی ژنتیک، گروه زراعت و اصلاح نباتات، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
doi
10.22059/ijfcs.2016.60132چکیده
باکتری اسپورزای Bacillus anthracis عامل بیماری سیاهزخم (آنتراکس) است. سه جزء پروتئین شامل پادگن (آنتیژن) حفاظتی (PA)، عامل کشندۀ (LF) و عامل آماس (EF) عاملهای بیماریزای این باکتری به شمار میآیند. به منظور تولید واکسن بر پایۀ گیاه، پروتئین امتزاجی دمین چهارPA و دمین یک LF، با سایت برش فورینی به زیر واحد B سم Vibrio cholera (CTB) بهعنوان محرک سامانۀ ایمنی متصل شد. همچنین در این تحقیق برای ساخت ناقل دوتایی از خاصیت ناحیۀ ′3 و ′5 غیرترجمه شوندۀ ویروس موزاییک لوبیا چشمبلبلی بهعنوان تشدیدکنندۀ ترجمه و از ژن بازدارندۀ خاموشی ویروس موزاییک خیار (2b) استفاده و ترکیب پادگن ساختهشده به گیاه منتقل شد. انتقال موقت سازهها با کمک اگروباکتریوم به توتون و کاهو انجام و بیان موقت در سطح ترانسکریپتوم از روش PCR RT- و در سطح پروتئوم از روش آزمون الایزا تأیید شد.
