انتقال همزمان 3 ژن‌ باکتریایی بی‌فنیل دی‌اکسیژنز به گیاه آرابیدوپسیس

نویسندگان

1 کارشناس ارشد دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ساری، مازندران

2 استادیار دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ساری، مازندران

3 دانشیار پژوهشکدۀ ژنتیک و زیست‌فناوری کشاورزی طبرستان دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ساری، مازندران

doi
10.22059/ijfcs.2015.54054
چکیده

بی‌فنیل‌های پلی‌کلرینه‌شده (PCBs)، ترکیبات حلقوی کلرداری هستند که به‌‌دلیل خواصی چون مقاومت به حرارت و پایداری، در سطح گسترده در دهه‌های 1930 تا 1980 در صنایع گوناگون کاربرد داشته‌اند. همین ویژگی‌ پایداری و مقاوت به تجزیه شدن همراه با تأثیرات زیانبار بر سلامت انسان، سبب شد که تولید آنها از دهۀ 1980 میلادی متوقف شود. در حال حاضر، آلودگی آب‌ها و خاک‌های سراسر جهان به PCBs، یکی از مشکلات مهم محیط زیست به‌شمار می‌آید. یکی از راه‌های کاهش آلودگی به PCBs انتقال و بیان ژن‌های باکتریایی بی‌فنیل دی‌اکسیژناز (BPDO) که دارای توانایی تجزیۀ PCBs هستند به گیاهان است. هدف پژوهش حاضر، یافتن روشی برای انتقال همزمان ژن‌های bph A، bph E و bph G، که اجزای رمزدهندۀ آنزیم BPDO هستند به گیاه آرابیدپسیس بود. براساس نتایج به‌دست‌آمده، 3 ژن ­bph A، bph E و bph G که در ناقل pGreen کلون شده بودند به باکتری‌های E.coli و اگروباکتریوم‌های LBA4404 و  C58C1 و در انتها به گیاه آرابیدپسیس انتقال یافتند. از لحاظ کارایی انتقال ژن به گیاه، بین دو سویۀ اگروباکتریوم LBA4404 و  C58C1‌به‌کار‌رفته در این پژوهش اختلاف وجود داشت. بیشترین تعداد گیاهان تراریخته (85/0 درصد) با سویۀLBA4404  به‌دست آمد. تراریخت بودن گیاهچه‌های آرابیدوپسیس با انتخاب گیاهان کاملاً سبز در محیط دارای 50 میلی‌گرم در لیتر کانامایسین و همچنین آزمون PCR  تأیید شد. گیاهان تراریخت با موفقیت به خاک انتقال یافتند و به رشد خود ادامه دادند.