تخلیص آنزیم لیپاز از بخش قدامی رودۀ ماهی قزل‌آلای رنگین‌کمان (Oncorhynchus mykiss)

نویسندگان

1 دانشیار بخش بیوتکنولوژی مؤسسۀ تحقیقات واکسن و سرم‏سازی رازی، کرج، ایران.

2 استادیار گروه شیلات دانشکدۀ منابع طبیعی دانشگاه تهران،کرج، ایران.

3 کارشناس ارشد بخش بیوتکنولوژی مؤسسۀ تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی کرج، ایران.

4 دانشجوی کارشناسی ارشد گروه شیلات دانشکدۀ منابع طبیعی دانشگاه تهران،کرج، ایران.

5 استادیار گروه شیلات دانشکدۀ منابع طبیعی و محیط‌زیست دانشگاه ملایر، ملایر، ایران.

doi
10.22059/jfisheries.2014.52407
چکیده

در سال‌های اخیر آبزیان به‌منزلۀ منبع استخراج آنزیم‎هایی مانند لیپاز مورد توجه قرار گرفته‎اند. امعا و احشای ماهی قزل‎آلای رنگین‌کمان منبع بسیار مناسبی برای جداسازی آنزیم‎ است. در این تحقیق، آنزیم لیپاز از بخش قدامی رودۀ ماهی قزل‎آلای رنگین‌کمان تخلیص شد. برای تخلیص، از استون برای چربی‎زدایی، از آمونیوم سولفات برای راسب‌سازی، از اولترافیلتراسیون برای تغلیظ نمونه و از ستون کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون برای جداسازی آنزیم موردنظر استفاده شد. میزان فعالیت آنزیم لیپاز تخلیص‌شده با استفاده از پارانیتروفنیل پالمیتات به‌منزلۀ سوبسترا و میزان پروتئین این آنزیم با استفاده از روش لوری، در مراحل مختلف تخلیص سنجش شد. در این تحقیق پارامترهایی مانند درصد بازده و میزان تخلیص نیز در هر مرحله بررسی شد. نتایج نشان داد در آخرین مرحلۀ تخلیص، میزان فعالیت و پروتئین آنزیم به ترتیب 171/6 واحد در میلی‌لیتر و 53/0 میلی‌گرم در میلی‌لیتر، درصد بازده تخلیص برابر با 53/7 و میزان تخلیص برابر با 49/5 بود. وزن مولکولی آنزیم تخلیص‌شده با استفاده از روش SDS-PAGE، 32 کیلو دالتون تعیین شد. بر اساس این تحقیق می‎توان نتیجه گرفت که آنزیم لیپاز رودۀ ماهی قزل‎آلای رنگین‌کمان دارای کارایی مناسبی است و می‎تواند در آینده به‌منزلۀ مادۀ افزودنی در صنایع مرتبط و تحقیقات بیوتکنولوژی مورد توجه قرار گیرد.