تخلیص آنزیم لیپاز از بخش قدامی رودۀ ماهی قزلآلای رنگینکمان (Oncorhynchus mykiss)
نویسندگان
1 دانشیار بخش بیوتکنولوژی مؤسسۀ تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، کرج، ایران.
2 استادیار گروه شیلات دانشکدۀ منابع طبیعی دانشگاه تهران،کرج، ایران.
3 کارشناس ارشد بخش بیوتکنولوژی مؤسسۀ تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی کرج، ایران.
4 دانشجوی کارشناسی ارشد گروه شیلات دانشکدۀ منابع طبیعی دانشگاه تهران،کرج، ایران.
5 استادیار گروه شیلات دانشکدۀ منابع طبیعی و محیطزیست دانشگاه ملایر، ملایر، ایران.
doi
10.22059/jfisheries.2014.52407چکیده
در سالهای اخیر آبزیان بهمنزلۀ منبع استخراج آنزیمهایی مانند لیپاز مورد توجه قرار گرفتهاند. امعا و احشای ماهی قزلآلای رنگینکمان منبع بسیار مناسبی برای جداسازی آنزیم است. در این تحقیق، آنزیم لیپاز از بخش قدامی رودۀ ماهی قزلآلای رنگینکمان تخلیص شد. برای تخلیص، از استون برای چربیزدایی، از آمونیوم سولفات برای راسبسازی، از اولترافیلتراسیون برای تغلیظ نمونه و از ستون کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون برای جداسازی آنزیم موردنظر استفاده شد. میزان فعالیت آنزیم لیپاز تخلیصشده با استفاده از پارانیتروفنیل پالمیتات بهمنزلۀ سوبسترا و میزان پروتئین این آنزیم با استفاده از روش لوری، در مراحل مختلف تخلیص سنجش شد. در این تحقیق پارامترهایی مانند درصد بازده و میزان تخلیص نیز در هر مرحله بررسی شد. نتایج نشان داد در آخرین مرحلۀ تخلیص، میزان فعالیت و پروتئین آنزیم به ترتیب 171/6 واحد در میلیلیتر و 53/0 میلیگرم در میلیلیتر، درصد بازده تخلیص برابر با 53/7 و میزان تخلیص برابر با 49/5 بود. وزن مولکولی آنزیم تخلیصشده با استفاده از روش SDS-PAGE، 32 کیلو دالتون تعیین شد. بر اساس این تحقیق میتوان نتیجه گرفت که آنزیم لیپاز رودۀ ماهی قزلآلای رنگینکمان دارای کارایی مناسبی است و میتواند در آینده بهمنزلۀ مادۀ افزودنی در صنایع مرتبط و تحقیقات بیوتکنولوژی مورد توجه قرار گیرد.