تولید آنزیم لیپاز با استفاده از تکنیک واکسن میکروبی مخلوط از دو جدایه باکتری محلی Kytococcus sedentarius وPseudomonas oleovorans با استفاده از مواد زائد جامد پزشکی

نویسندگان

1 گروه زیست شناسی، دانشکده آموزش علوم محض، دانشگاه انبار، انبار، عراق

2 گروه زیست شناسی، دانشکده آموزش علوم محض، دانشگاه انبار، انبار، عراق

doi
10.22103/jab.2025.24695.1647
چکیده

هدف از این مطالعه، جداسازی و شناسایی سویه‌های باکتریایی محلی است که قادر به تجزیه ضایعات پزشکی در حین تولید آنزیم‌های لیپاز هستند. عوامل کلیدی موثر بر تولید آنزیم، از جملهpH، دما و ترکیب مواد مغذی، برای افزایش عملکرد بهینه شدند. این یافته ها به مدیریت پایدار زباله و کاربردهای آنزیم صنعتی کمک می‌کند. مواد و روش‌ها: این مطالعه در آزمایشگاه‌های گروه علوم زیستی دانشکده آموزش علوم محض دانشگاه انبار انجام شد. جدایه‌های باکتریایی محلی که قادر به تجزیه مواد زائد جامد پزشکی بودند با استفاده از روش‌های تشخیصی استاندارد شناسایی شدند. شناسایی با استفاده از سیستم Vitek تایید شد که جدایه ها را به عنوان Kytococcus sedentarius و Pseudomonas oleovorans طبقه بندی کرد. تولید لیپاز با استفاده از روش کشت غوطه‌ور، با زباله‌های پزشکی جامد به عنوان منبع اصلی کربن و انرژی انجام شد. عوامل مختلفی که بر تولید آنزیم تأثیر می‌گذارند؛ از جمله pH، دما، اندازه تلقیح، منبع نیتروژن، غلظت ضایعات و مدت زمان هچ برای تعیین شرایط بهینه مورد بررسی قرار گرفتند. فعالیت آنزیم اندازه گیری شد و اثر مکمل نیتروژن بر تولید لیپاز ارزیابی شد.نتایج: جدایه‌های باکتریایی Kytococcus sedentarius و Pseudomonas oleovorans کارایی بالایی در تخریب مواد زائد جامد پزشکی و تولید آنزیم‌های لیپاز نشان دادند. شرایط بهینه برای حداکثر بازده آنزیم به pHبرابر 8، دمای 45 درجه سانتیگراد، حجم تلقیح 6 میلی لیتر در هر 100 میلی لیتر محیط و غلظت ضایعات 2 گرم در هر 100 میلی لیتر محیط تعیین شد. تحت این شرایط، بیشترین فعالیت آنزیمی ثبت شده 5/8 واحد در میلی لیتر بود. افزودن منبع نیتروژن منجر به کاهش فعالیت آنزیم از 5/8 به 1/8 واحد در میلی لیتر شد، که نشان می‌دهد محیط زباله پزشکی جامد نیتروژن کافی را فراهم می‌کند و مکمل‌های اضافی به عنوان بازدارنده تولید آنزیم عمل می‌کنند.نتیجه‌گیری: یافته‌ها حاکی از آن است که زباله‌های پزشکی جامد می‌توانند به عنوان یک بستر مناسب برای تولید آنزیم عمل کنند و به طور همزمان ضایعات را کاهش دهند و محصولات زیستی ارزشمندی تولید کنند. علاوه بر این، مهار مشاهده شده از فعالیت آنزیم توسط مکمل نیتروژن بر اهمیت بهینه سازی ترکیب مواد مغذی تأکید می‌کند. این تحقیق به مدیریت ضایعات پایدار و تولید آنزیم صنعتی کمک می‌کند و راه را برای مطالعات بیشتر در مورد برنامه‌های کاربردی در مقیاس بزرگ هموار می‌کند.