تولید آنزیم کراتیناز از جدایه محلی Kocuria rosea با استفاده از زباله های محیطی
نویسندگان
1 استاد گروه زیست شناسی، دانشکده آموزش علوم محض، دانشگاه انبار، انبار، عراق.
2 استاد گروه زیست شناسی، دانشکده آموزش علوم محض، دانشگاه انبار، انبار، عراق.
3 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه زیست شناسی، دانشکده آموزش علوم محض، دانشگاه انبار، انبار، عراق.
doi
10.22103/jab.2025.24585.1642چکیده
هدف: کراتیناز آنزیمی است که به همراه بسیاری دیگر از آنزیمهای تجزیه کننده پروتئین به گروه متالوپروتئازها تعلق دارد. کراتیناز یک آنزیم تخصصی است که روی سوبسترا (کراتین) عمل میکند و پیوندهای شیمیایی قوی کراتین را میشکند. این مطالعه با هدف تولید آنزیم کراتیناز با استفاده از جدایههای باکتری محلی بهدستآمده از نمونههای خاک و ضایعات طیور از مناطق مختلف استان الانبار عراق با استفاده از مواد زاید مختلف مانند سم، شاخ و پوست انجام شد.مواد و روشها: از 20 نمونه خاک و ضایعات طیور، 17 جدایه باکتریایی به دست آمد که توانایی بالایی برای رشد در محیط کشت پر آگار مورد استفاده برای جداسازی را نشان دادند. پنج ایزوله باکتریایی کارآمد بر اساس قطر کلنیهای رشد کرده روی محیط کشت پر آگار انتخاب شدند. در این میان، ایزوله باکتری با کد محلی A2 پس از کشت پنج ایزوله منتخب بر روی محیط کراتینه خالص، به عنوان کارآمدترین جدایه در تجزیه کراتین انتخاب شد. جدایه باکتری بر اساس ویژگیهای مورفولوژیکی، فرهنگی، میکروسکوپی و آزمایشهای بیوشیمیایی شناسایی شد. برای تایید هویت از دستگاه VITEK 2 Compact استفاده شد.نتایج: نتایج نشان داد که جدایه Kocuria rosea بود. شرایط بهینه برای تولید آنزیم از Kocuria rosea شامل دما، pH، اندازه تلقیح، منبع کربن و غلظت آن، منبع نیتروژن و غلظت آن و زمان انکوباسیون مورد بررسی قرار گرفت. بر اساس آزمایشها و نتایج آنها، محیط تهیهشده با سمهای گوسفندی برای رشد کوکوریا رزا و تولید کراتیناز انتخاب شد، بهویژه که این ضایعات در دسترس و ارزان قیمت در محیط محلی است. نتایج مطالعه شرایط بهینه نشان داد که بهترین تولید آنزیم کراتیناز در دمای 30 درجه سانتی گراد، pH برابر 8/0، سرعت تکان دادن 150 دور در دقیقه، با 3 گرم در 100 میلی لیتر سم گوسفند در محیط، 5 میلی لیتر در 100 میلی لیتر تلقیح بود. با استفاده از اوره به عنوان منبع نیتروژن در غلظت 1/0 گرم در 100 میلی لیتر و زمان انکوباسیون 72 ساعت فعالیت آنزیمی به U/ml 301/0 رسید.نتیجهگیری: این یافتهها بر پتانسیل Kocuria rosea در کاربردهای بیوصنعتی، به ویژه در فرآیندهای مربوط به بازیافت زبالههای کراتین و مدیریت زباله پایدار تأکید میکند.