OCT4B1و نقش آن در مهار بیان ژنهای خانواده TRAFدر ردههای سلول سرطانی (AGS، 5637 و U87MG)
نویسندگان
1 مرکز تحقیقات پزشکی ملکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان، رفسنجان ، ایران
2 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان، رفسنجان ، ایران
3 دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان،رفسنجان،ایران
4 مرکز تحقیقات پزشکی ملکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان، رفسنجان ، ایران
5 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان، رفسنجان ، ایران
doi
چکیده
مقدمه: OCT4یکی از ژنهای مهم و تأثیرگذار بر مکانیسم خود بازآفرینی سلول (cell renewal) و هسته مرکزی مجموعه پروتئینی است که بهعنوان عامل بنیادی بودن (Stemness) عمل میکنند. این ژن واریانتهای متعددی از پروتئین OCT4 را کد میکند که مشهورترین آنهاOCT4B1 است. این واریانت به میزان بالایی در ردههای سلول سرطانی و نیز بافتهای سرطانی بیان میشود.. آپوپتوزیس توسط خانوادههای مختلف ژنی کنترل و انجام میشود و یکی از این گروههای ژنی خانواده TRAF (TNF receptor-associated factor) است که شامل سه ژن (TRAF1، TRAF2 وTRAF3 ) میباشد. اطلاعاتی در مورد تأثیر واریانت OCT4B1 بر بیان ژنهای خانواده TRAF، در دست نیست، بنابراین هدف این مطالعه بررسی تأثیر مهار واریانت OCT4B1 بر بیان سه ژن خانواده TRAF میباشد. مواد و روشها: ردههای سلول سرطانی AGS (آدنوکارسینوم معده)،5637 (تومور مثانه) و U87MG (تومور مغز) در دو گروه تست و کنترل و با شرایط یکسان کشت و پس از رسیدن به تراکم سلولی موردنظر با استفاده از siRNA اختصاصی OCT4B1 (گروه تست) و scramble siRNA (گروه کنترل) مورد ترانسفکشن قرار گرفتند. پس از 48 ساعت RNA سلولی تخلیص و cDNA مربوطه سنتز گردید و با روش PCR Array، بیان ژنهای موردنظر (خانوادهTRAF)، در هر رده سلولی و گروههای دوگانه تست و کنترل تعیین و بیان هر ژن با استفاده از نرمافزار اختصاصی شرکت SA Biosciences (RT) RTمحاسبه گردید. یافتهها: نتایج نشان داد تغییرات بیان ژنی در سه رده سلول سرطانی موردمطالعه تقریباً مشابه است و بیان هر سه ژن موردمطالعه، به دنبال مهار OCT4B1، کاهش معنیداری را نشان میدهد. نتیجهگیری: طبق نتایج به دستآمده، مهار OCT4B1 باعث مهار بیان ژنهای خانواده TRAF و القاء آپوپتوزیس در ردههای سلول سرطانی میشود. بنابراین تأثیر مهار OCT4B1 بر فرایند آپوپتوزیس میتواند در مطالعات آتی شناخت مکانیسم ایجاد و درمان سرطان مورد توجه قرار گیرد.