استفاده از Nested-PCR در مطالعه انتشار انگل Cryptosporidium spp در پرندگان اهلی

نویسندگان

1 دانشکده پرستاری، دانشگاه القادسیه، عراق

2 دانشکده بیوتکنولوژی، دانشگاه القادسیه، عراق

3 دانشکده علوم، دانشگاه القادسیه، عراق

doi
10.22103/jab.2024.23071.1556
چکیده

هدف: ین مطالعه به بررسی تعداد موارد عفونت Cryptosporidium spp. در پرندگان اهلی در استان دیوانیه و همچنین پیامدهای این بیماری و روش های تشخیص آن پرداخت.مواد و روش‌ها: در این مطالعه، 205 نمونه از گونه های مختلف پرنده بدون در نظر گرفتن جنسیت مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. برخی از روش‌های مورد استفاده برای تشخیص، روش رنگ آمیزی اسید فست و تکنیک نستد PCR بود. ثابت شد که نستد PCR بهتر از رنگ آمیزی اسید فست AFS است. زیرا می‌تواند کریپتوسپوریدیوم را سریعتر، با بالاترین دقت و حساسیت شناسایی کند.نتایج: نتایج نشان داد که 90 نمونه از کل نمونه‌ها دارای عفونت کریپتوسپوریدیوم بودند. در بین گونه های پرنده مورد مطالعه، falseco eleonorae  با 16% کمترین بروز کریپتوسپوریدیوزیس را داشت، در حالی که گالوس گالوس داخلی با 3/53 درصد بیشترین بروز را داشت. از 60 نمونه گرفته شده برای هر گونه، 3/48 درصد از گونه Meleagris gallopova و 6/41 درصد از گونه Anas platyrhynchos آلوده بودند. بررسی میکروسکوپی میزان عفونت 9/43 درصد (90 نمونه از 205 نمونه) را در مقایسه با روش دیگر نشان داد. برای استفاده از Nested-PCR برای شناسایی مولکولی، DNA باید از نمونه های آلوده مثبت با استفاده از روش پروتئیناز K استخراج شود. این کار باندهای مثبتی را تولید کرد که معمولاً در محدوده 587 جفت بازی تکثیر می‌شدند. تست Nested-PCR نشان داد که 5/47 درصد نمونه ها (19 از 40 نمونه) آلوده بودند.نتیجه‌گیری: در نهایت، این مطالعه با نشان دادن شیوع بسیار بالای عفونت کریپتوسپوریدیوم در پرندگان اهلی در استان دیوانیه، نیاز حیاتی به ابزارهای تشخیصی کارآمد و طرح‌های مداخله‌ای را برجسته کرد. به منظور جلوگیری از گسترش کریپتوسپوریدیوزیس در پرندگان، نتایج بر استفاده از روش‌های واکنش زنجیره‌ای پلیمراز نستد (nested-PCR) برای تشخیص عفونت تاکید دارد.