بررسی بیان ژن MYH7 در بافتهای ران، دست و راسته برههای پرواری نژاد کرمانی
نویسندگان
1 استاد بخش علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، ایران
2 دانشجوی کارشناسی ارشد بخش علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، ایران
3 دانشیار، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران
4 استادیار، دانشکده کویرشناسی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران.
doi
10.22103/jab.2023.21524.1486چکیده
هدف: ماهیچه های اسکلتی حدود 40 درصد وزن بدن را تشکیل میدهند و عملکردهای زیادی، مانند حفظ انرژی مورد نیاز، حفظ وضعیت بدنی و محافظت از بافتهای نرم را به عهده دارند. رشد طبیعی ماهیچههای اسکلتی پیش نیاز حیوانات برای حفظ فعالیتهای طبیعی زندگی و متابولیسم است و هر گونه رشد غیر طبیعی ماهیچهها منجر به بیماری میشود. بر اساس تجزیه و تحلیل پروفایل های بیان ژن در ماهیچه اسکلتی ژن MYH7 به عنوان ژن کاندیدای مربوط به انقباض عضلانی شناسایی شده است. هدف این مطالعه، بررسی بیان ژن MYH7 در بافتهای ران، دست و راسته برههای پرواری نژاد کرمانی بود.مواد و روشها: در پژوهش حاضر نمونه برداری از شش راس بره نر کرمانی از بافتهای ران، دست و راسته با سه تکرار در هنگام کشتار انجام شد و تعداد کل 54 نمونه به دست آمد. RNA کل با استفاده از کیت استخراج (شرکت دنازیست) انجام شد. کیفیت و کمیتRNA استخراج شده با روش الکتروفورز روی ژل آگارز 2 درصد و با استفاده از دستگاه نانودراپ مورد ارزیابی قرار گرفت. برای سنتز cDNAاز روی RNA استخراج شده از کیت سنتز cDNA شرکت parstous استفاده شد. از واکنش real time PCR به روش Syber Green برای بررسی میزان نسبی بیان ژنها استفاده شد. از روش Pfaffl et al. (2002) برای تجزیه و تحلیل داده های حاصل از real time PCR استفاده شد.نتایج: نتایج بررسی کیفیت RNAهای استخراج شده در طول موج A260/A280 نشان داد که کیفیت 8/1-9/1 مناسب و مطلوب است. به علاوه، مشاهده دو باند 18S و 28S برای RNA روی ژل آگارز نشان داد که RNA سالم است و نبود باند اضافی روی ژل نشان داد که RNA استخراج شده خالص است. نتایج منحنیهای real time PCR و الکتروفورز محصولات PCR روی ژل آگارز (2 درصد) نشان داد که ژن MYH7 در بافتهای دست، ران و راسته برههای نر کرمانی تکثیر و بیان میشود. در بافتهای دست، ران و راسته باند 283 جفت بازی برای ژن MYH7 و برای ژن بتااکتین باند 112 جفت بازی در همه نمونهها مشاهده شد. این مشاهدات نشانگر این بود که آزمایش صحیح انجام شده است و قطعات مورد نظر به درستی تکثیر شدهاند. نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که این ژن در سه بافت دست، ران و راسته بیان میشود.نتیجهگیری: در پژوهش حاضر مشخص شد که ژن MYH7 در بافتهای ماهیچههای ران، دست و راسته بیان میشود. لذا، میتوان نتیجه گرفت که ژن MYH7 در ماهیچههای مختلف، که برای تولید بیشتر گوشت در نژادهای گوشتی بسیار ضروری هستند نقش ایفا میکند.