آنالیز شبکه هم‌‌بیان ژن وزنی (WGCNA) در جو و بیان ژن های هاب درگیر در مرحله جوانه‌زنی

نویسندگان

1 استاد، گروه علوم و زیستفناوری گیاهی، دانشکده علوم و فناوری زیستی ، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران

2 استادیار، پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی (ABRII) ،سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

3 استادیار، پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی (ABRII) ،سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

4 دانشجوی دکتری، گروه علوم و زیستفناوری گیاهی، دانشکده علوم و فناوری زیستی ، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران

5 دانشجوی دکتری، گروه علوم و زیستفناوری گیاهی، دانشکده علوم و فناوری زیستی ، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران

doi
10.22103/jab.2022.20183.1427
چکیده

هدف: جوانه زدن بذر فرآیند مهمی است که شروع چرخه زندگی گیاه بذر را تعیین می کند. با این حال، مکانیسم مولکولی جوانه زنی بذر در جو نامشخص است. برای درک مکانیسم مولکولی جوانه زنی بذر در جو، از آنالیز WGCNA برای شناسایی هاب و ژن ­های پاسخگو و آشکارسازی بیان ژن ها در جوانه زنی بذر استفاده شد.WGCNA ، ابزار ارزشمندی برای مطالعه همبستگی بین ژن ها، شناسایی ماژول های با همبستگی بالا و شناسایی ژن­های Hub در ماژول­های مختلف است.مواد و روش‌ها: داده­های خام ریزآرایه مربوط به مرحله جوانه زنی از پایگاه داده ریزآرایه GEO برای 0 ساعت، 3 ساعت، 9 ساعت، 18 ساعت، 33 ساعت و 71 ساعت پس از مرحله جوانه زنی به دست آمد. سپس از آنالیز شبکه هم‌­بیان ژن وزنی (WGCNA)  برای تشخیص ژن­‌های شبکه هم‌بیان شده استفاده شد. در تحقیق حاضر، از رقم جو مهتاب برای نشان دادن الگوی بیان پس از 9 ساعت، 18 و 71 ساعت پس از مرحله جوانه­زنی استفاده شد. تعداد کل 4137 ژن با بیان متفاوت (DEG)  شناسایی شد که برخی از ژن‌ها بیان بیشتری را در مهتاب نشان دادند و سه ژن با qRT-PCR تأیید شدند.نتایج: بیشتر اینDEG ها در فرآیندهای متابولیک، فرآیندهای سلولی، گلیکولیز و پاسخ به محرک نقش داشتند. ژن هاب در MEbrown پروتئین ابرخانواده آلفا/بتا هیدرولاز، ME ارغوانی پروتئین 4 حاوی دامنه U-box و MEdarkgrey فاکتور رونویسی حاوی دامنه B3 ABI3 بود که با بذرهای جوانه زده همبستگی مثبت داشت. نتایج یک پایگاه داده ریزآرایه و ژن­های کاندید برای مطالعه بیشتر جو در مراحل جوانه زنی را نشان داد. علاوه بر این، DEG ها توسط WGCNA به سه ماژول تقسیم شدند. در این مطالعه، ماژول­‌های ژنی مرتبط با جوانه‌زنی بذر در طول جوانه‌زنی بذر جو شناسایی شدند. فاکتور رونویسی و آلفا/بتا هیدرولاز نقش مهمی در مرحله جوانه زنی داشتند. همچنین، ماژول­های ژنی و ژن­های هاب در 9 ساعت، 18 و 71 ساعت پس از جوانه زنی شناسایی شدند. با توجه به کمبود اطلاعات در مورد نیازهای جوانه زنی بذر جو، این تحقیق به منظور بررسی مکانیسم­های جوانه زنی بذر و همچنین ارزیابی ژن­های هاب جهت بررسی مکانیسم مولکولی جوانه زنی بذر در جو انجام شد.نتیجه‌گیری: نتایج مطالعه حاضر بینش جدیدی را در مورد مکانیسم مولکولی زیربنایی جوانه زنی بذر جو ارائه می­دهد. بر اساس تجزیه و تحلیل شبکه، فاکتورهای رونویسی و پروتئین­های یوبیکوئیتین در جوانه زنی نقش داشتند. بیشتر ژن­‌های مربوط به هر ماژول مربوط به پروتئین­‌های درگیر در متابولیسم کربوهیدرات، گلیکولیز و تجزیه پروتئین بودند. نتایج بیان ژن ما می­تواند به عنوان نشانگر مولکولی در ارقام جو در طول جوانه زنی بذر عمل کند. این یافته ها می­تواند برای انتخاب کمک مولکولی و اصلاح ژنوتیپ های جو سریع جوانه زن مناسب باشد.