اثر غلظتهای مختلف کیتوزان بر تولید اسیدهای فنلی در کشت سلول کاهوی موجدار (Lactuca undulate Ledeb)
نویسندگان
1 دانشجوی دکتری فیزیولوژی گیاهی گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه گلستان، گرگان، ایران.
2 دانشیار گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه گلستان، گرگان، ایران.
3 استادیار گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه گلستان، گرگان، ایران
doi
10.22103/jab.2022.18773.1369چکیده
هدف: استفاده از الیسیتورها در کشت سلولی گیاهان یکی از مهمترین روشها جهت افزایش تولید متابولیتهای ثانویه است. کیتوزان بیوپلیمری است که از واحدهای D-گلوکزآمین ساخته شده و در دیواره سلولی قارچها و اسکلت خارجی بندپایان یافت میشود. القای پاسخهای دفاعی، افزایش فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدان و مسیر فنیلپروپانوئیدها، تجمع ترکیبات فنلی و فلاوونوئیدها از جمله پاسخهای گیاهان به تیمار کیتوزان میباشد. هدف از پژوهش حاضر بررسی اثر کیتوزان بعنوان یک الیسیتور در افزایش تولید اسیدهای فنلی در سوسپانسیون سلولی کاهوی موجدار (Lactuca undulateLedeb) است.مواد و روشها: ابتدا سوسپانسیون سلولی از کالوسهای 45 روزه حاصل از قطعه جداکشت برگ کاهوی موجدار در محیط کشت MS 2/1 حاوی 1/0 و 1 میلیگرم در لیتر 2,4-D و Kin تولید شد. سپس اثر غلظتهای مختلف کیتوزان (0، 50، 100 و 200 میلیگرم در لیتر) در بازه زمانی 24، 48 و 72 ساعت بر سوسپانسیون سلولی مورد بررسی قرار گرفت. بعد از برداشت نمونهها، درصد زندهمانی، مقدار فنل و فلاوونوئید کل، شیکوریک اسید، کلروژنیک اسید، کافئیک اسید و پراکسیداسیون لیپیدها و فعالیت آنزیم فنیلآلانینآمونیالیاز (PAL) مورد بررسی قرار گرفت.نتایج: دادههای حاضر نشان داد که غلظت کیتوزان و مدت زمان تیمار عوامل تعیینکننده در مقدار ترکیبات فنلی ازجمله شیکوریک اسید در سوسپانسیون سلولی کاهوی موجدار است. مقدار شیکوریک اسید در تیمار 50 میلیگرم در لیتر کیتوزان پس از 24 ساعت نسبت به تیمار شاهد 8/2 برابر افزایش نشان داد. بیشترین مقدار کلروژنیک اسید و کافئیک اسید پس از 24 و 48 ساعت تیمار با غلظت 200 میلیگرم در لیتر کیتوزان بدست آمد. بعلاوه نتایج حاضر بیانگر اثر تیمار کیتوزان بر افزایش فنل و فلاوونوئید کل همراه با افزایش فعالیت آنزیم PAL بوده است. افزایش مقدار پراکسیداسیون لیپیدها و کاهش درصد زندهمانی سلولها در غلظتهای بالای کیتوزان نشاندهنده اثر منفی آن بر فعالیت سلولها است.نتیجهگیری: نتایج حاضر نشان داد کیتوزان در غلظتهای پایین سبب افزایش مقدار شیکوریک اسید در سوسپانسیون سلولی کاهوی موجدار شده که از آن میتوان در صنایع داروسازی به عنوان روشی نوین در تولید شیکوریک اسید و مشتقات آن استفاده کرد.