بررسی اثرات چندشکلیهای ژنهای ATPase6 و ATPase8 بر بلوغ برونتنی تخمک و کشت برونتنی جنین در گوسفند سنجابی
نویسندگان
1 علوم دامی، دانشگاه رازی
2 گروه علوم دامی، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه رازی
3 هیات علمی، علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه رازی
doi
10.22103/jab.2021.16667.1270چکیده
هدف: میتوکندری به دلیل نقش های مهمی که در متابولیسم سلول دارد و به دلیل اینکه عمدتا از طریق مادر در حیوانات به ارث می رسد، یک منبع عالی برای توضیح وراثت سیتوپلاسمی است. در حیوانات اهلی مطالعات مختلفی ارتباط بین چندشکلیهای DNA میتوکندری و صفات تولیدی و تولید مثلی را گزارش کرده اند. هدف از این مطالعه بررسی چندشکلی ژنهای ATPase6 و ATPase8 و اثر آنها بر میزان موفقیت بلوغ برونتنی تخمکها (IVM) و کشت برونتنی جنینها (IVC) در گوسفندان سنجابی بود. مواد و روشها: نمونههای خون و تخمدان میشهای بالغ از کشتارگاه بیستون واقع در کرمانشاه جمع آوری شد. در آزمایشگاه پس از جداسازی بافت اضافی پیرامون تخمدانها و شستشوی آنها، مجموعه کومولوس- تخمکهای با قطر بیشتر از 3 میلی متر از فولیکولها آسپیراسیون شد. تعداد 100 نمونه که تعداد بیش از دو تخمک داشتند، به دیشهای حاوی محیط بلوغ انتقال داده شدند. بعد از بلوغ تخمکها، برای لقاح برون تنی هر نمونه، از اسپرم تازه قوچ سنجابی استفاده شد. برای کشت برون تنی، زیگوتهای تشکیل شده در مرحله قبلی در محیط مایع تخمدانی سنتز شده به مدت 48 ساعت کشت داده شدند. استخراج DNA با استفاده از روش نمکی انجام شد. قطعه 895 جفت بازی از DNA میتوکندری که شامل ژنهای ATPase6 و ATPase8 بود با استفاده از PCR تکثیر شدند و نمونهها با استفاده از یک روش تغییر یافته SSCP ژنوتیپ شدند. برای بررسی ارتباط الگوهای مشاهده شده با نرخ بلوغ و کشت رویان از آزمون ناپارامتری کروسکال-والیس استفاده شد. نتایج: نتایج این مطالعه وجود چند شکلیها در نواحی ژنی مورد مطالعه را نشان داد و پنج الگوی مختلف باندی A (50 درصد) ، B (12 درصد) ، C (9)، D (21) و E (8 درصد) برای ژنها مشاهده شد. تجزیه و تحلیل ارتباط این الگوها با نرخ بلوغ و کشت رویان حاکی از نبود ارتباط معنی دار بین آنها بود (p>0.05). نتیجهگیری: با وجود مشاهده چندشکلی در ژنهای ATPase6 و ATPase8 با استفاده از روش تغییر یافته SSCP، این چندشکلی های تاثیری بر نرخ بلوغ و کشت رویان نداشتند.