مطالعهی مورفولوژیکی و فیلوژنتیکی قارچهای میکوریز آربوسکولار همزیست با ریشهی برخی گیاهان دارویی استان کرمان
نویسندگان
1 دانشکده کشاورزی،دانشگاه ولیعصر،رفسنجان،ایران
2 استادیار، گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان، خرمآباد، ایران
3 گروه گیاهپزشکی،دانشکده کشاورزی،دانشگاه لرستان،خرمآباد،ایران
4 گروه گیاهپزشکی،دانشکده کشاورزی،دانشگاه لرستان،خرمآباد،ایران
doi
10.22103/jab.2020.15110.1189چکیده
هدف: گیاهانی که ریشهی آنها با قارچ های میکوریز آربوسکولار رابطهی همزیستی دارند، نسبت به گیاهان غیرمیکوریزی، توانایی بالاتری دربرابر تنشهای مختلف زنده و غیرزندهی محیطی همچون خشکی، شوری و آفات و بیماریهای گیاهی دارند. هدف از این مطالعه، بررسی گونههای مختلف AMF در استان کرمان است. شناسایی این میکروارگانیسمها مبنایی برای مطالعات بیشتر در مورد استفاده از این میکروارگانیسمها در جوانهزنی ، رشد و تکثیر گیاهان دارویی است. مواد و روشها: بهمنظور شناسایی مولکولی و مورفولوژیکی قارچهای میکوریز آربوسکولار، نمونهبرداری از منطقهی ریزوسفر گیاهان دارویی در برخی مناطق استان کرمان انجامشد. اسپورهای قارچ میکوریز آربوسکولار از خاکهای نمونهبرداری شده با استفاده از روش الک مرطوب جداسازی شدند. گروهبندی بر اساس اسلاید میکروسکوپی و ویژگیهایمورفولوژیکی مانند رنگ اسپور، شکل، تزئینات سطح، اندازه و ساختار دیواره آنها و خصوصیات اسپور ها در آب انجام شد. استخراج DNA از تک اسپور انجام شد. بخشی از DNAریبوزومی با روش PCR آشیانهای، با استفاده از آغازگرهای SSUmaf و LSUmAr در مرحله اول و SSUmCf و LSUmBr در مرحله دوم تکثیر گردید و محصول PCRپس از الکتروفورز افقی ژل آگاروز و مشاهدهی باند مربوطه برای توالی یابی ارسال شد. سپس نتایج توالییابی با استفاده از نرمافزارهای BLAST، Gene Runner و Clustal Omega مورد بررسی قرار گرفت و با استفاده از نرمافزار MEGA 7، درخت فیلوژنی رسم شد. یافتهها: براساس بررسیهای مورفولوژیکی و مولکولی، گونههای Viscospora viscosa،Septoglomus deserticola ، Funneliformis caledonius،Funneliformis mosseae و Diversispora spurca شناسایی گردید. در انتها، وجود و چگونگی قرابت گونه های شناسایی شده در درخت فیلوژنی مورد بررسی قرار گرفت. نتیجهگیری: ازآنجا که ویژگیهای مورفولوژیکی مورد استفاده در شناسایی و ردهبندی قارچهای میکوریز محدود میباشند، میتوان برای ردهبندی مطمئنتر از روشهای مولکولی استفاده کرد و از این طریق تمایز گونههای مشابه از نظر مورفولوژیکی و یا تشابه نمونههای متفاوت از نظر ظاهری را تشخیص داد.