بررسی پروموتر ژن S-Like RNase در برنج تراریخت

نویسندگان

1 شیراز شیراز- کیلومتر12 جاده شیراز اصفهان -منطقه باجگاه- دانشکده کشاورزی - گروه زراعت و اصلاح نباتات

2 استاد بخش اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهرکرد، شهرکرد، ایران.

3 استاد موسسه تحقیقاتCSIRO، کنبرا، استرالیا.

4 استادیار ، گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی کشاورزی ، دانشکده کشاورزی ، دانشگاه شهرکرد ، شهرکرد ، ایران.

5 شهرکرد شهرکرد-دانشگاه شهرکرد-صندوق پستی 115-دانشکده کشاورزی-گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی

doi
10.22103/jab.2018.2015
چکیده

گروه ژن­های RNase در فرایندهای حیاتی سلولی همچون همانند­سازی DNA، رونویسی، پیرایش و کنترل ترجمه، شرکت می­کنند.S-Like  ریبونوکلئازها (S-Like RNase)، همولوگS  ریبونوکلئاز (S-RNase)­ها هستند، ولی آنها در ناسازگاری گیاه مشارکتی ندارند. در گیاهان دو لپه­ای S-Like RNase­ها نقش مهمی در انتقال مجدد فسفات طی فرایند پیری دارند، همچنین آنها در فرایندهای کمبود فسفات معدنی، دفاع سلولی و زخم­های فیزیکی القا می­شوند. اثرات RNase­ها در پاسخ به خشکی می­تواند به دلیل اثرات متقابل بین چندین فعالیت مختلف آنها باشد. در این تحقیق پروموتر ژن S-Like RNase در بالادست ژن بتا گلوکرونیداز (GUS) قرار داده­شد سپس سازه مورد نظر توسط الکتروپوریشن به آگروباکتریوم تومفاسینس، سویه LBA 4404، انتقال داده­شد و سپس به کمک هم کشتی، گیاه تراریخت ایجاد شد. با استفاده از روش رنگ‌آمیزی هیستوشیمیائی فعالیت پروموتر ژن S-Like RNase در بافت‌ ریشه، برگ و بساک برنج بررسی گردید. نتایج نشان داد که پروموتر این ژن دارای فعالیت بالایی در بساک برنج می‌باشد درحالیکه میزان فعالیت آن در برگ کم و در ریشه نیز ناچیز بوده­است. بررسی بروز پروموتر این ژن در بافت­های مختلف، نتایج بیان بالای ژن S-Like RNase در بساک در مقایسه با بافت­های دیگر که با استفاده از آنالیز q-PCR در مطالعات قبلی مشخص شده­بود را تکمیل و تائید می­کند.