آنالیز مولکولی و بررسی بیان ژن استیل ترانسفراز مخمریAYT1) ) جهت سمزدایی توکسین فوزاریومی DON در لاینهای نسل دوم گندم تراریخته (Triticum aestivum )
نویسندگان
1 دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعنی شاهرود
2 دانشیار پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران
3 استادیار دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعنی شاهرود
4 استادیار دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعنی شاهرود
doi
10.22103/jab.2016.1388چکیده
گندم یکی از مهمترین غلات تامینکننده نیازهای غذایی انسان در کشورهای مختلف جهان، بخصوص کشورهای در حال توسعه است. بلایت فوزاریومی سنبله گندم یکی از بیماریهای رایج و آسیبرسان به این محصول است که عامل این بیماری قارچ Fusarium graminearum میباشد. این بیماری علاوه بر تاثیر منفی بر روی عملکرد محصول، با تولید مایکوتوکسینهای خطرناکی نظیر توکسین دیاکسینیوالنول (DON) بر روی کیفیت دانههای تولیدی نیز اثرات منفی میگذارد و خطراتی را برای سلامتی انسان و دام در پی دارد. ایجاد تغییر شیمیایی در ساختار توکسین DON میتواند از تجمع این توکسین درون دانه بکاهد. ژن AYT1 کدکننده یک آنزیم استیل ترانسفرازی بوده و در کاهش سمیت توکسین DON نقش دارد. در این تحقیق گیاهان نسل دوم گندم تراریخته حاوی این ژن، جهت بررسی تلفیق پایدار و بیان مناسب ژن انتقالیافته با استفاده از روشهای مولکولی شامل PCR، RT-PCR و روش دورگه سازی سادرن مورد آنالیز قرار گرفتند. نتایج به دست آمده حاکی از حضور پایدار و بیان مناسب ژن AYT1 در اکثر گیاهان نسل دوم گندم تراریخته مورد بررسی بود. واکنش RT-PCR از روی RNA استخراج شده در گیاهان تراریخته، نشاندهنده رونویسی ژن در سطح RNA در 23 لاین از گیاهان مورد مطالعه بود. نتایج آنالیز دورگهسازی سادرن جهت بررسی تعداد نسخههای ژنی ورودی در گیاهان تراریخته مورد بررسی، حاکی از ورود بیش از یک نسخه از ژن AYT1 در برخی از لاینهای مورد بررسی بود.