ایجاد گیاهان زودگلده آرابیدوپسیس از طریق خاموش کردن ژن CLF به روش RNA silencing

doi
10.22103/jab.2014.1312
چکیده

کنترل زمان گلدهی نیازمند فعالیت متوالی ژن­های مختلفی است که خود تحت کنترل فاکتورهای محیطی و درونی می­باشند. برخی از این ژن­ها از قبیل Curly Leaf (CLF) نقش مهارکنندگی در آغاز گلدهی دارند. بنابراین، با خاموش کردن این قبیل ژن­ها می­توان آغاز گلدهی در گیاهان را تسریع کرد. در این تحقیق، از تکنیکRNA Silencing  برای خاموش کردن ژن CLF در گیاه آرابیدوپسیس جهت بررسی قابلیت­های این روش در تولید گیاهان زودگلده استفاده شد. ابتدا، برای تولید ساختار­ سنجاق سری (Hairpin)، قطعه­ای از ژن CLF آرابیدوپسیس به روش PCR تکثیر و در دو مرحله، در دو جهت سنس و آنتی­سنس در وکتور pFGC5941 همسانه سازی شد. در مرحله­ بعد، وکتور حاصل به روش آگروباکتریوم، به گیاه آرابیدوپسیس انتقال ­یافت. همانطور که انتظار می­رفت، گلدهی در گیاهان تراریخته­ بدست آمده، زودتر از گیاهان طبیعی صورت گرفت. در تایید نتایج بدست آمده، آزمایش RT-qPCR نشان داد که در مقایسه با گیاهان طبیعی، بیان ژن CLF در گیاهان تراریخته کاهش و برعکس، بیان ژن FT که یک ژن محرک گلدهی است، افزایش یافته است. نتایج این تحقیق نشان می­دهد که از RNA Silencing، می­توان به عنوان یک روش جدید و سریع  به منظور ایجاد گیاهان زودگلده استفاده کرد.