اثر مدل‌سازی‌هایTaqMan Real-time PCR برای اصالت‌سنجی برگرهای مرغ

نویسندگان

1 دانش آموخته دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران

2 گروه بیوشیمی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران

3 مرکز تحقیقات روغن‌ها و چربی‌ها، پژوهشکده فناوری‌های سلامت، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران؛ گروه علوم و صنایع غذایی، دانشکده علوم تغذیه و صنایع غذایی، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران

4 کارشناس آزمایشگاه رفرانس مرکزی، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران

5 مرکز تحقیقات روغن‌ها و چربی‌ها، پژوهشکده فناوری‌های سلامت، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران؛ گروه علوم و صنایع غذایی، دانشکده علوم تغذیه و صنایع غذایی، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران

doi
10.22059/jvr.2025.384001.3462
چکیده

زمینه مطالعه: گزارش‌هایی حاکی از تقلب استفاده از کنجاله سویا به‌عنوان جایگزین بخشی از مرغ در برگرهای مرغ وجود دارد، بنابراین اصالت‌سنجی برگرهای مرغ از اهمیت بالایی برخوردار است.هدف: با‌توجه‌به کارآمد بودن روش‌های PCR در شناسایی گونه در فراورده‌های گوشتی، 2 مدل و اعتبارسنجی با تکنیک TaqMan Real-time PCR  برای اصالت‌سنجی برگر مرغ به کار گرفته شد.روش‎کار: مناطق Cytb و S rRNA18 به‌ترتیب برای شناسایی مرغ و کنترل داخلی استفاده شدند. مخلوط‌‌‌های مرجع مرغ/کنجاله سویا با درصد مرغ 01/0، 1/0، 1، 10 و 100 (وزنی/وزنی) برای رسم منحنی استاندارد نسبی و رقت سریالی DNA استخراج‌شده از نمونه‌های مرغ خالص برای رسم منحنی مطلق به کار گرفته شدند. همچنین مرحله اعتبارسنجی پس از تأیید منحنی استاندارد دارای شاخصه‌های قابل‌قبول، با استفاده از نمونه‌های مدل (مخلوط­های مدل 60، 30، 10 و 5 درصد مرغ ـ سویا (وزنی / وزنی) و برگر 75 درصد گوشت مرغ) انجام شد.نتایج: منحنی­های ترسیم‌شده برای هر دو مدل با استفاده از مخلوط­های مرجع دارای شاخصه‌های قابل‌قبول مطابق با معیار‌های تعیین‌شده برای ارزیابی‌های qPCR بودند، به‌طوری‌که  R2برای 2 منحنی به‌ترتیب 9986/0 و 9993/0، شیب 2647/3- و 5333/3- و درصد کارایی تکثیر 44/102 و 88/91 تعیین شدند. همچنین در مرحله اعتبارسنجی، استفاده از نمونه‌های مدل و ارزیابی آن‌ها با تکنیک تعریف‌شده  TaqMan-qPCR نشان داد که مقادیر درصد RSD (پارامتر دقت) قابل‌قبولی برای همه نمونه‌ها با استفاده از هر دو مدل (<25 درصد) حاصل شد، اما مقادیر درصد Bias (پارامتر صحت) برای نمونه‌های مدل ارزیابی‌شده با مدل مطلق در محدوده قابل‌پذیرش (25 درصد±) نبودند.نتیجه­گیری نهایی: مدل نسبی با دقت و صحت قابل‌قبولی و با حساسیت تشخیصی 1/0 درصد می‌تواند گوشت مرغ را در برگرهای مرغ شناسایی کند و برای اصالت‌سنجی برگرهای مرغ و جلوگیری از برچسب‌گذاری اشتباه در سطح عرضه به کار گرفته شود.