ارزیابی کارایی آنتی سرم پلی‌کلونال علیه موتیف حفظ شده هماگلوتینین ویروس آنفلوانزا در تشخیص ویروس‌های هومولوگ و هترولوگ

نویسندگان

1 دانش‌آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

2 گروه بهداشت و بیماری‌های پرندگان، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

3 مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

4 مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

doi
10.22059/jvr.2023.352766.3314
چکیده

زمینه مطالعه: بیماری آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ H9N2 از مهم‌ترین بیماری‌های ویروسی ماکیان در کشورهای آسیایی به شمار می‌رود. جهش‌های متعددی که در گلیکوپروتئین سطحی هماگلوتینین HA به عنوان آنتی‌ژن اصلی ویروس رخ می‌دهند، تفسیر نتایج آزمایش‌های سرولوژی برپایه HA را با مشکل مواجه می‌کنند.هدف: در مطالعه تجربی حاضر، توانایی آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه موتیف حفاظت شده پروتئین HA در شناسایی جدایه‌های هترولوگ H9N2 مورد بررسی قرار گرفت.روش‎کار: بر اساس داده‌های بیوانفورماتیک، موتیف حفاظت شده پروتئین HA انتخاب و در ناقل (+)pET-28a بیان شد. برای تولید آنتی سرم پلی‌کلونال، پپتید نوترکیب با ادجوان روغنی مخلوط و به جوجه‌های SPF تزریق شد. به طور مشابه آنتی سرم حاصل از ویروس غیرفعال تهیه شد. کارایی آنتی سرم‌ها در آزمایش ممانعت از هماگلوتیناسیون HI متقاطع با ویروس‌های H9N2 هومولوگ و هترولوگ مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج: در واکنش با آنتی سرم پلی‌کلونال، میانگین عیار آنتی‌بادی HI علیه ویروس‌های هومولوگ و هترولوگ یکسان و برابر 5 برآورد شد. این عیار با آنتی سرم ویروس غیرفعال برای ویروس هومولوگ 7 و برای ویروس‌های هترولوگ بسیار کمتر برآورد شد. این اختلاف از نظر آماری معنی‌دار بود.نتیجه­گیری نهایی: با ارزیابی‌های انجام شده این آنتی سرم دارای کارایی مناسب در شناسایی جدایه‌های متفاوت ویروس H9N2 می‌باشد و در مقایسه با آنتی سرم معمول با دقت بیشتری آنتی‌ژن‌های مختلف یک تحت تیپ را تشخیص می‌دهد. آنتی سرم پلی‌کلونال حاصل فاقد بازدارنده‏های غیراختصاصی می‌باشد که ممکن است تفسیر یافته‏های سرولوژی را با مشکلاتی مواجه نماید؛ این نتایج نشان داد آنتی سرم پلی‌کلونال توان شناسایی ویروس‌های H9N2 جدا شده در سال‌های مختلف با آزمایش HI را دارد، هرچند معتبرسازی آن مستلزم انجام آزمایش با تعداد بیشتر ویروس است.