جداسازی و کشت اولیه سلولهای ستیغ عصبی از لوله عصبی جنین جوجه
نویسندگان
1 دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، دانشکده علوم پزشکی، گروه علوم تشریحی، آزمایشگاه تحقیقاتی جنینشناسی و سلولهای بنیادی، اردبیل، ایران
2 دانشگاه علومپ زشکی اردبیل، دانشکده علوم پزشکی، گروه علوم تشریحی، آزمایشگاه تحقیقاتی جنینشناسی و سلولهای بنیادی، اردبیل، ایران
3 دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، دانشکده علوم پزشکی، گروه علوم تشریحی، آزمایشگاه تحقیقاتی جنینشناسی و سلولهای بنیادی، اردبیل، ایران
doi
10.52547/JCT.11.4.275چکیده
هدف: هدف از این مطالعه ارائه یک روش ساده و کارآمد جهت جداسازی و تعیین خصوصیت سلولهای ستیغ عصبی از بافت لوله عصبی میباشد.مواد و روشها: تخم مرغهای نطفهدار حدود 35 ساعت در دمای 38 درجه سانتیگراد و رطوبت نسبی 55 تا 60 درصد در داخل انکوباتور قرار داده شدند تا جنینها بهمراحل 10-12 طبق جدول تکاملی هامبورگر-هامیلتون رسیدند. سپس جنینها از روی سطح زرده تخم مرغ جداسازی شده و لوله عصبی از جنین جوجه جدا و بهمدت 24 ساعت در ظروف کشت سلولی، کشت داده شد تا سلولهای ستیغ عصبی از آن جدا شوند. آنگاه لوله عصبی از کف ظروف کشت جدا و خارج شد و به سلولها بهمدت 5 روز اجازه تکثیر و ازدیاد داده شد. در نهایت این سلولها جمعآوری شدند و جهت ارزیابی پروفایل بیان ژن، PCR صورت گرفت.نتایج: سلولهای ستیغ عصبی از لوله عصبی جدا شده و در شرایط کشت گسترش یافتند. این سلولها همچنین نشانگرهای Slug، Sox9 و Sox10 را بهروش RT-PCR بیان کردند.نتیجهگیری: سلولهای ستیغ عصبی میتوانند در محیط آزمایشگاهی از لوله عصبی رها شده و در شرایط کشت مناسب و ساده تکثیر و گسترش یابند.