ساخت پروتئین نوترکیب FanC اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک مرتبط با اسهال گوساله

نویسندگان

1 گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

2 گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

3 گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

4 گروه ایمونولوژی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران

5 پژوهشکده زیست فناوری و مهندسی زیستی، دانشگاه صنعتی اصفهان، اصفهان، ایران

doi
10.22059/jvr.2017.207837.2479
چکیده

زمینه مطالعه: اسهال یکی از بیماری های شایع و مهمترین عامل مرگ و میر و تاخیر رشد در گوساله های زیر یک ماه است. در بین سویه های اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک که مسبب اسهال در گوساله های یک تا هفت روزه هستند، سویه‌های واجد فیمبریه F5 اهمیت زیادی دارند. بخش FanC فیمبریهF5  نقش اساسی در اتصال باکتری به یاخته های روده و آغاز بیماری داشته و پادتن های تولید شده بر علیه آن اثر حفاظتی دارند. هدف: ساخت و ارزیابی بیان پروتئین نوترکیب FanC اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک مرتبط با اسهال گوساله. روش کار: در این مطالعه پلاسمید پروکاریوتی ‌pET-28a حاوی قسمت fanC فیمبریه F5  طراحی و ساخته شد و تولید پروتئین حاصل از پلاسمید طراحی شده در باکتری (DE3) ا BL21 اثبات رسید. نتـایـج: حاصل این تحقیق ساخت پلاسمید پروکاریوتی pET-28a حامل ژن FanC و تهیه پروتئین خالص آن پس از بیان ژن در باکتری (DE3)اBL21 بود که با روش‌های تعیین توالی و وسترن بلاتینگ به اثبات رسید. نتیجـه‌گیـری نهایی: پروتئین FanC و سویه باکتری نوترکیب تولید شده را می‌توان در آزمون‌های تشخیصی و همچنین طراحی و تولید واکسن کلی باسیلوز گوساله به کار برد.