تولید پروتئینهای نوترکیب فسفولیپاز D و پروتئین شوک حرارتی کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس

نویسندگان

1 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران

2 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران

3 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران

4 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران

5 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران

doi
10.22059/jvr.2017.61367
چکیده

زمینه مطالعه: بیماری لنفادنیت پنیری ناشی از کورینه‌باکتریوم سودوتوبرکلوزیس یکی از مهم‌ترین بیماری‌های گوسفند و بز است که منجر به ضرر‌های اقتصادی دام‌پروران می‌شود. فسفولیپاز Dا(PLD) این باکتری یک اگزوتوکسین قوی است که به‌عنوان یک عامل حدت اصلی آن در نظر گرفته می‌شود و احتمالاًً در انتشار باکتری از محل عفونت به سایر قسمت‌های بدن میزبان مشارکت دارد. پروتئین‌های شوک حرارتی (HSPs) کاندیدا‌های خوبی برای تهیه واکسن‌ها هستند چون هم ایمنی هومورال و هم ایمنی سلولی را تحریک ‌می‌کنند. هدف: مطالعه حاضر باهدف تولید پروتئین‌های نوترکیب PLD و HSP60 کورینه‌باکتریوم سودوتوبرکلوزیس جهت فراهم شدن زمینه‌ی بررسی توان محافظت‌کنندگی و ساخت واکسن ضد این باکتری صورت گرفت. روش کار: ژن‌های PLD و HSP60، در پلاسمید pMAL-c2X کلون گردیدند و در اشرشیا‌کلی سویه DH5 ترانسفورمه شدند. بیان پروتئین‌ها با استفاده از روش SDS-PAGE بررسی‌شده و صحت ردیف نوکلئوتیدی محصولات کلون شده با تعیین توالی نوکلئوتیدی مورد تأیید قرار گرفتند. نتایج: نتایج نشان داد که اشرشیا‌کلی سویه DH5 ترانسفورمه شده به‌خوبی پروتئین‌های فوق را بیان می‌نماید. پروتئین‌های نوترکیب بیان‌شده تقریباً به‌طور کامل محلول بودند. نتیجه‌گیری نهایی: با توجه به امکان تولید پروتئین‌های نوترکیب فوق، در مطالعات بعدی می‌توان ایمنی‌زایی و محافظت‌کنندگی آن‌ها در برابر عفونت‌های ناشی از کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس را موردسنجش قرارداد.