ردیابی مولکولی ژن مقاوم به کینولونها (gyrA) درجدایههای باکتری یرسینیاراکری با آزمون PCR

نویسندگان

1 فارغ التحصیل دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد- ایران

2 باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد- ایران

3 گروه بهداشت و بیماریهای آبزیان، دانشکده دامپزشکی واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد-ایران

doi
10.22059/jvr.2016.57400
چکیده

زمینه مطالعه: یرسینیاراکری عامل بیماری دهان قرمزآنتروباکتریایی یا یرسینیوز (یکی از بیماریهای مهم آزاد ماهیان پرورشی) است. هدف: مطالعه حاضر باهدف ردیابی ژن مقاوم به کینولون‌ها (gyrA) در باکتری یرسینیاراکری صورت پذیرفت. روش کار: به منظور انجام این تحقیق شش مزرعه پرورش ماهی قزل‌آلای رنگین‌کمان استان چهار محال و بختیاری مورد بررسی قرار گرفت. به طوریکه از هر مزرعه 10 عدد و در مجموع 60 عدد ماهی مشکوک به بیماری با اندازه cm‌12-8 به طور تصادفی انتخاب و اقدام به نمونه برداری از انتهای روده آنها و کشت بر روی محیط TSAر(Tripticase Soy Agar) گردید. سپس محیط‌ها به انکوباتور انتقال و بعد از 24 ساعت گرم‌خانه گذاری در دمای C° 22، برروی پرگنه‌های رشد یافته آزمون‌های کاتالاز، اکسیداز و رنگ گرم انجام شده وآنهایی که گرم منفی، کاتالاز مثبت و اکسیداز منفی بودند به محیط کشت اختصاصی واتمن شاتس منتقل شدند. پس از گرم‌خانه گذاری در دمای C°22 به مدت 48 ساعت از پرگنه‌های رشد یافته تست PCR انجام شد. در مرحله بعد بر روی باکتری‌های یرسینیا راکری شناسایی شده ردیابی ژن gyrA با استفاده از آزمون PCR صورت پذیرفت. نتایج: نتایج آزمون‌های باکتری شناسی، بیوشیمیایی و مولکولی تحقیق حاضرنشان داد که 3 نمونه از کل باکتری‌های مورد بررسی، باکتری یرسینیا راکری بوده و در همه آنها ژن gyrA ردیابی گردید. نتیجه‌گیری‌نهایی: شناسایی ژن مقاومت به کینولون‌ها در باکتری یرسینیا راکری می‌تواند دلیلی بر کاهش کارایی درمانی این دسته آنتی بیوتیک‌ها در مزارع پرورش ماهی باشد و لذا بایستی سیاست کنترل و درمان بیماریهای عفونی به ویژه دهان قرمزآنتروباکتریایی تغییر کند.