طراحی نانوحسگر زیستی برپایه نانوذرات نقره سنتزشده با استفاده از عصاره آبی ‏گل داوودی ‏‏(‏Chrysanthemum morifolium‏) جهت تشخیص با حساسیت بالای ‏لاکتات دهیدروژناز

نویسندگان

1 گروه زیست‌شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ‏ایران

2 مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، دانشگاه ‏علوم ‏پزشکی، لرستان، ایران

3 گروه زیست‌شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ‏ایران

4 گروه زیست‌شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ‏ایران

doi
10.30473/eab.2024.71436.1953
چکیده

لاکتات دهیدروژناز (‏LDH‏) یک آنزیم کلیدی در متابولیسم سلولی است که در تمام جانوران یافت می‌شود. این آنزیم نقش ‏مهمی در تبدیل اسید پیروویک به اسیدلاکتیک و بالعکس ایفا می‌کند. ‏LDH‏ در طیف وسیعی از بافت‌ها و سلول‌های بدن ‏جانوران، وجود دارد. در دهه اخیر، نانوذرات به‌دلیل خواص منحصربه‌فردشان برای طراحی حسگرهای نوری و الکترونیکی ‏مورداستفاده قرار گرفته‌اند. این پژوهش یک روش مبتنی بر  رنگ‌سنجی جدید را ارائه می‌دهد؛ نانوذرات نقره‌ای که از طریق ‏عصاره آبی گل داوودی سنتز شده‌اند برای تشخیص مستقیم فعالیت لاکتات دهیدروژناز استفاده می‌شود. ابتدا، گل داوودی زیر ‏نظر کارشناسان از گلخانه‌های شهرستان محلات جمع‌آوری شد، بعد از جداسازی و تهیه پودر بخش گل گیاه، عصاره آبی گل ‏داوودی تهیه گردید؛ در ادامه با هدف تهیه نانوذرات نقره از طریق عصاره آبی و اضافه‌شدن محلول نیترات نقره با بررسی و ‏بهینه‌سازی مناسب به تهیه نانوذرات نقره پرداخته شد. در مرحله بعد دو ویال تهیه‌شد؛ هر ویال شامل مخلوط واکنش حاوی ‏Tris‏-‏HCl، ‏MgCl2‎‏ وNADH ‎‏ بود، در یکی از ویال‌ها علاوه بر مواد محلول ذکرشده ‏LDH‏ نیز اضافه شد. سپس نانوذرات ‏نقره و بوروهیدروسدیم به آن اضافه گردید. آنزیم می‌تواند +‏NAD‏ را به ‏NADH‏ تبدیل ‌کند. مکانیسم تشخیص آنزیم لاکتات ‏دهیدروژناز براساس تجمع نانوذرات نقره است که منجر به افزایش اندازه نانوذرات می‌شود و این امر باعث تغییر رنگ می‌گردد. ‏به ‌این‌ترتیب وجود یا عدم وجود آنزیم به‌راحتی با چشم غیرمسلح در طی یک مرحله قابل‌تشخیص است. در حضور آنزیم، رنگ ‏محلول مورداستفاده در پژوهش زرد و زمانی که آنزیم وجود نداشت، رنگ محلول مایل به خاکستری بود. در نتیجه می‌توان آنزیم ‏لاکتات دهیدروژناز را با حساسیت بالا شناسایی کرد.‏