بررسی تاثیر آسکوربیک اسید بر زیستایی سلول‌‌های بنیادی مزانشیمی کشت ‏شده بر روی داربست ‏سلول‌زدایی‌شده عضله اسکلتی

نویسندگان

1 گروه علوم جانوری و زیست‌شناسی دریا، دانشکده ‏علوم و فناوری زیستی، دانشگاه شهید بهشتی، ‏تهران، ایران‏

2 گروه علوم جانوری و زیست‌شناسی دریا، دانشکده ‏علوم و فناوری زیستی، دانشگاه شهید بهشتی، ‏تهران، ایران‏

3 گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، موسسه ‏آموزش عالی غیرانتفاعی آل طه، تهران، ایران‏

doi
10.30473/eab.2023.68207.1913
چکیده

مهندسی بافت رشته ای نوظهور است که بر سه عنصر سلول، داربست و مولکول های زیستی فعال استوار بوده و می­تواند برای درمان آسیب های عضلانی مفید باشد. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر آسکوربیک اسید (AA) بر زیستایی سلول‌های بنیادی مزانشیمیِ مغز استخوانِ (BM-MSCs) کشت شده بر روی داربستِ سلول زدایی شده­ عضله­ اسکلتی می‌باشد. ابتدا BM-MSC از مغز استخوان پای رت استخراج و کشت شده و هویت سلول‌ها با استفاده از فلوسایتومتری بررسی شد. همچنین عضله اسکلتی پای رت، استخراج گردیده و با استفاده از محلول %1 SDS سلول زدایی انجام شد. برای اطمینان از سلول زدایی، رنگ آمیزی­های اختصاصی ماسون تریکروم، آلسیان بلو و DAPI انجام شد. سپس BM-MSCs روی داربست های سلول زدایی شده کشت شدند و با AA یک میلی­مولار به مدت 2 روز تیمار شدند. سپس با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) و روش MTT به ترتیب بقاء و میزان زیستایی سلول‌ها بررسی شد. BM-MSCs مورفولوژی دوکی داشته و نتایج فلوسایتومتری نشان دهنده بیان   CD44 وCD90  و نیز عدم بیان CD45 و CD34 در بیش از 90 درصد سلول‌ها بود. رنگ آمیزی های اختصاصی حفظ کلاژن و گلیکوزآمینوگلیکان­ ها و عدم حضور DNA را در بافت سلول زدایی شده اثبات کردند. نتایج MTT  نشان داد که AA به طور معنی داری باعث افزایش زیستایی BM-MSCs می­شود (05/0(P<. همچنین نتایج SEM نشان داد که سلول‌ها در ­گروه تیمار شده با AA، گسترش بیشتری داشتند. بطور کلی، AA می­تواند با افزایش زیستایی BM-MSCs، بازده مهندسی بافت عضله را بهبود بخشد.