بررسی اثر مایع یونی غیر ایمیدازولی ‏تری‌اتیل‌آمونیوم مالئات برآنزیم اوریکاز

نویسندگان

1 دکتری، گروه بیوشیمی، دانشکده علوم، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران

2 استاد، گروه بیوشیمی، دانشکده علوم، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران

3 دانشیار، گروه بیو تکنولوژی، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم ‏محیطی، دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته، کرمان، ایران

4 دانشیار، گروه شیمی، دانشکده علوم، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران

doi
10.30473/eab.2021.58066.1822
چکیده

اوریکاز آنزیمی تترامر و کروی از گروه اکسیدوردوکتازها و فاقد کوفاکتوراست. تاکنون تحقیقات زیادی در مورد این آنزیم به‌دلیل کاربردهای آن در علم پزشکی به‌عنوان یک عامل درمانی و تشخیصی انجام شده است. اوریکاز تخریب اسید اوریک و تولید آلانتوئین را کاتالیز می‌کند. قسمتی از کیت تشخیصی که برای سنجش غلظت اسید اوریک در خون  استفاده می‌شود، اوریکاز است. در این تحقیق، تأثیر مایع یونی غیر ایمیدازولی تری‌اتیل‌آمونیوم مالئات بر عملکرد آنزیم اوریکاز بررسی شد. مایعات یونی نمک‌هایی با خواص مهمی مانند پایداری حرارتی زیاد، قدرت حلالیت زیاد و قطبیت زیاد هستند. برخی ازمایعات یونی به‌عنوان تثبیت‌کننده برای ذخیره طولانی مدت پروتئین‌ها استفاده می‌شوند و ماندگاری پروتئین‌هایی مانند پروتئین‌های درمانی یا صنعتی را افزایش می‌دهند. در این مطالعه، آنزیم را با غلظت‌های مختلف مایع یونی تری‌اتیل‌آمونیوم مالئات تیمار کردیم. درصد حجمی این مایع یونی 1%، 2%، 5%، 10% و 15% می‌باشد. نتایج نشان می دهد که تری‌اتیل‌آمونیوم مالئات تأثیر وابسته به غلظت بر فعالیت آنزیم اوریکاز دارد. استفاده از مایع یونی تری‌اتیل‌آمونیوم مالئات با غلظت 5 درصد باعث افزایش فعالیت کاتالیزوری آنزیم در مقایسه با آنزیم تیمارنشده می‌شود. همچنین دما و pH بهینه برای فعالیت آنزیم به‌واسطه تیمار با مایع یونی مذکور تغییر می‌کند. بروز تغییرات در میانکنش‌های داخل ساختاری آنزیم از جمله تغییر در پیوندهای هیدروژنی، الکترواستاتیک و فعل و انفعالات واندروالس و در نتیجه تغییرات ساختاری آنزیم باعث افزایش فعالیت اوریکاز و بهبود کارایی کاتالیزوری و همچنین تغییر دما و pH بهینه آنزیم می‌شود. درضمن با توجه به نتایج، اوریکاز تیمارشده در pHهای قلیایی فعالیت بیشتری نسبت به اوریکازآزاد دارد و در برابر pHهای قلیایی مقاومت نشان می‌دهد و هیچ‌گونه کاهش فعالیت که ناشی از به‌هم‌ریختگی ساختار آنزیم و دناتوراسیون است نشان نمی دهد. این نتیجه برای استفاده از تری‌اتیل‌آمونیوم مالئات درزمینه هایی که باید یوریکاز در pH های قلیایی استفاده شود کاربردی است.

کلیدواژه‌ها