جداسازی، شناسایی و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آسپارژیناز خارج سلولی فاقد خاصیت گلوتامینازی جداشده از خاک
نویسندگان
1 کارشناس ارشد میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری های زیستی، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران.
2 دانشگاه شهید بهشتی دانشیار گروه میکروبیولوژی و زیست فناوری میکروبی، دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران
3 استادیار گروه میکروبیولوژی و زیست فناوری میکروبی، دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران
doi
10.22034/cmr.2025.2294چکیده
مقدمه: آنزیم ال- آسپاراژیناز کاربردهای زیادی در صنایع مختلف اعم از دارویی، پزشکی، غذایی و ... دارد. هدف مطالعه حاضر بهینه سازی ویژگی های آنزیمی ال-آسپاراژیناز فاقد فعالیت گلوتامینازی می باشد. مواد و روش ها: جداسازی اولیه با استفاده از محیط M9 تغییر یافته انجام شد. کلنی های دارای هاله صورتی و مولد ال-آسپاراژیناز برای مطالعه فعالیت آسپاراژینازی و فعالیت گلوتامینازی انتخاب گردیدند. فعالیت آنزیمی با روش نسلر اندازه گیری شد. تاثیر عوامل مختلف از جمله زمان انکوباسیون، دما، pH و اثر یونهای مختلف بر روی فعالیت آسپاراژینازی مورد سنجش قرار گرفت. نتایج: در این مطالعه، یکی از 17 جدایه که دارای فعالیت آسپاراژینازی بالا و فاقد فعالیت گلوتامینازی بود، برای ادامه پژوهش انتخاب شد. براساس توالییابی 16SrDNA و خصوصیات ریخت شناسی و بیوشمیایی، باکتری جداسازی شده با 99.9% شباهت با عنوان سویهی 1 sbu- Bacillus subtilis شناسایی شد. آنزیم آسپاراژیناز تولید شده توسط این باکتری در دمای 40 درجه سانتیگراد، 7 =pH بالاترین میزان فعالیت آنزیمی ( U/ml 80/8) را داشته است، همچنین یون های کبالت و کلسیم به ترتیب باعث افزایش فعالیت آسپاراژینازی تا حدود 112% و 107% شده است.بحث و نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده، این پژوهش می تواند به معرفی آنزیم آسپاراژیناز جدید بدون فعالیت گلوتامینازی، در جهت کاهش سمیت، حساسیت زایی و عوارض جانبی ناشی از مصرف دارو کمک کند.