بیان پروتئین نوترکیب EIT در شرایط شبیه ساز بی وزنی

نویسندگان

1 عضو هیات علمی ایران، تهران، پژوهشگاه هوافضا، وزارت علوم، تحقیقات و فناوری

2 دانشجوی کارشناسی ارشد پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

3 عضو هیات علمی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

doi
10.22034/cmr.2023.2173
چکیده

باکتری بیماریزای E. coli O157:H7 قادر به ایجاد طیف وسیعی از عوارض همانند اسهال خونی و سندرم اورمی همولیتیک میباشد. به دلیل مشکلات موجود در درمان آنتی بیوتیکی، به نظر میرسد ایمن سازی، مناسبترین روش مبارزه با این باکتری باشد. پروتئینهای (Intimin)، Tir و EspA، سه پروتئین اصلی در اتصال باکتری مذکور به اپیتلیال دستگاه گوارش میباشند. از طریق ممانعت از اتصال پروتئینهای مذکور در مراحل ابتدائی بیماری مهار خواهد شد. محققان با انتخاب بخشهای مؤثر پروتئینهای مذکور و تولید یک پروتئین نوترکیب کایمر، ایمونوژن کارآمدی جهت پیشگیری از بروز این بیماری ارائه نموده اند. از این رو دستیابی به مقادیر بالای پروتئین نوترکیب در کنار حفظ کیفیت و کارایی آن، بسیار مهم میباشد. با توجه به افزایش بیان کمّی و کیفی برخی پروتئینهای نوترکیب در شرایط حذف نیروی جاذبه، در مطالعه پیش رو بیان پروتئین نوترکیب EIT در شرایط شبیه ساز بیوزنی بر روی دستگاه کلینواستت مورد بررسی قرار گرفت. پس از بهینه سازی شرایط بیان و تائید پروتئین نوترکیب با روشهای ایمنولوژیک، در شرایط بی وزنی بیان آن القاء گردید و پس از تخلیص پروتئین توسط ستون کروماتوگرافی، مقدار آن مورد سنجش قرار گرفت. یافتهها حاکی از آن بودند که علی رغم کاهش میزان بیان در شرایط بی وزنی که احتمالاً به دلیل عدم هوادهی مناسب محیط کشت بوده است، هم چنان پروتئین نوترکیب با کیفیتی مناسب در شرایط بی وزنی تولید گردید. انتظار میرود با بهینه سازی شرایط و استفاده از روشهای هوادهی در بی وزنی، تولید پروتئینهای نوترکیب به طور قابل توجهی افزایش یابد.