جداسازی و شناسایی باکتریهای تولیدکننده آسپاراژیناز از پساب فراوری سیبزمینی
نویسندگان
1 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران
2 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذزبایجان، تبریز، ایران.
3 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران
4 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران
doi
چکیده
-آسپاراژیناز آنزیمی است که اسید آمینه ی آسپاراژین را به آسپارتیکاسید و آمونیاک هیدرولیز میکند. L -آسپاراژیناز داروئی برای درمان لوکمیا و لنفوما بهطور اساسی از باکتریهایی مانند Escherichia coli وErwina chrysanthemi تولید میشود و جستجو برای یافتن منابع جدید برای این آنزیم ادامه دارد. در این تحقیق جداسازی باکتریهای تولید کننده آنزیم L-آسپاراژینازاز پساب حاصل از فرآوری سیب زمینی انجام شد. پساب حاصل از مرحله شستشو، حاوی تمام ترکیبات محلول در آب سیبزمینی نظیر مقادیر قابل توجهی از اسید آمینه ی آسپاراژین است. جداسازی و غربالگری باکتریها بر روی محیطهای نوترینت آگار و محیط M9 انجام شد. دو جدایه با نامهای PW4 وPW5 قابلیت تولید آمونیوم در محیط M9 را دارا بودند. شناسایی مولکولی و آزمایشات بیوشیمیایی نشان داد که این جدایهها به ترتیب متعلق به جنس Escherichia وEnterococcus هستند. سنجش کمی و کیفی میزان تولید آنزیم این جدایهها در شرایط مختلف انجام شد. بیشترین میزان تولید را جدایهی PW4 در صورت رشد در محیط حاوی گلوتامین با میزانIUml-1 10 نشان داد. بیشینهی میزان تولید آنزیم توسط جدایهی PW5 نیز در نتیجه تغلیظ مایع رویی حاصل از کشت باکتری در محیط کشت حاوی آسپاراژین به میزان IUml-133/2 مشاهده شد. دو آنزیم بررسی شده فعالیت گلوتامینازی از خود نشان ندادند. نتایج نشان داد، بیشینهی فعالیت آنزیم تولیدی توسط جدایهی PW4 در دمای 37 درجه سلسیوس بوده و فعالیت آنزیم در دماهای پائینتر و بالاترکاهش از آن کاهش می یابد. این نتایج خاطرنشان می سازد که این آنزیم قابلیت مطالعات بیشتر جهت استفاده در طراحی دارو را دارا می باشد.