تولید پولولاناز نمک دوست خارج سلولی توسط Halorubrum Ha25 جدا شده از دریاچه پرشور آران و بیدگل

نویسندگان

1 دانشگاه تهران

2 دانشگاه تهران

3 دانشگاه تهران

4 دانشگاه تهران

doi
2746
چکیده

تا کنون تلاش های متعددی در جهت جداسازی آنزیم هایی که در شرایط سخت صنعتی پایداراند از میکروارگانیسم های کران دوست از جمله نمک دوست صورت گرفته است. آرکی نمک دوست افراطی سویه Ha25، آنزیم پولولاناز خارج سلولی نمک دوست و گرمادوست نسبی را در شرایط پرتنش در محیط کشت دارای 23% نمک تام تولید می کند. تعیین توالی ژن S rRNA16 و ویژگی های فنوتیپی نشان داد سویه Ha25 متعلق به جنس Halorubrum است. تولید آنزیم با میزان رشد هماهنگ بود و در میانه فاز سکون به بیشترین میزان خود رسید. ترشح این آنزیم در حضور نمک سدیم کلراید صورت گرفته و در حضور غلظت 3 تا 4 مولار نمک NaCl بیشینه تولید آنزیم مشاهده شد (U/ml 85). دما و pH بهینه برای تولید آنزیم به ترتیب 45 درجه سانتی گراد و0/7 تعیین شد. منابع مختلف کربن مانند مالتوز، نشاسته و پولولان به عنوان القا کننده و گلوکوز به عنوان مهار کننده تولید آنزیم شناسایی شدند. غلظت بهینه منیزیوم برای تولید آنزیم 0.1 مولار بوده و این در حالی است که هیچ رشدی و متعاقب آن، هیچ تولیدی در عدم حضور یون های منیزیوم مشاهده نشد. بیشینه فعالیت آنزیم در حضور غلظت 3 مولار نمک NaCl و در دمای 50 درجه سانتی گراد بوده و در دمای 45 و 35 درجه سانتی گراد به ترتیب کاهش 25% و 72% در فعالیت آنزیم مشاهده شد. pH بهینه برای فعالیت آنزیم 8 بوده و در pH 6 و 9، به ترتیب 49.5% و 32.4% از فعالیت آنزیم باقی ماند.