شناسایی و ردیابی Phytophthora erythroseptica و دورگهای آن با استفاده از آغازگرهای اختصاصی
نویسندگان
1 -
2 -
3 -
doi
10.22034/ijpp.2019.38325چکیده
گونهیPhytophthora erythroseptica ، عامل پوسیدگی صورتی سیبزمینی، یکی از اُاُمیستهای بیماریزای گیاهی است که خسارت اقتصادی قابل توجهی را در مزرعه و انبار وارد میکند. به منظور شناسایی و ردیابی دقیق و حساس P. erythroseptica ، شش توالی هستهای و میتوکندریایی برای طراحی آغازگرهای اختصاصی مورد بررسی قرار گرفت. به دلیل شباهت زیاد توالیهای P. erythroseptica به خویشاوندان نزدیکش، تنها یک توالی هستهای (TigA) برای طراحی آغازگرهای اختصاصی مناسب تشخیص داده شد. با استفاده از آغازگرهای اختصاصی طراحی شده، شیوهای از واکنش زنجیرهای ساده و تودرتو برای شناسایی و ردیابی P. erythroseptica ابداع شد. اختصاصیت آغازگرهای طراحی شده با استفاده از مجموعهای از گونههای فیتوفتورا متعلق به تبارهای فیلوژنتیکی مختلف و نیز خویشاوندان نزدیک P. erythroseptica ارزیابی شد. ردیابی P. erythroseptica در دیانای خالص بیمارگر و دیانای استخراج شده از بافتهای گیاهی آلوده شامل سیبزمینی، گوجهفرنگی و اسفناج با استفاده از آغازگرها با موفقیت انجام شد. آغازگرهای اختصاصی10 پیکوگرم از دیانای خالص P. erythroseptica را در واکنش زنجیرهای پلیمراز ساده ردیابی کردند، با این حال واکنش زنجیرهای پلیمراز تودرتو، حساسیت آغازگرها را حداقل صد برابر افزایش داد. همچنین، آغازگرهای اختصاصی قادر به ردیابی P. erythroseptica به عنوان والد پدری یا مادری در جدایههای دورگ بودند؛ این ویژگی به شناسایی یکی از والدین در دورگهای P. erythroseptica کمک شایانی میکند