بررسی فعالیت آنزیم بتا- ۱ و ۴ اندوگلوکاناز در سه نماتد بیمارگر گیاهی
نویسندگان
1 دانشجوی دکتری بیماری شناسی گیاهی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان.
2 دانشیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان.
3 دانشیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان.
4 دانشیار گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان.
doi
10.22034/ijpp.2019.36755چکیده
دیواره سلولی گیاه میزبان، سد مکانیکی اصلی برای نفوذ و مهاجرت نماتدهای انگل گیاهی محسوب میشود. این نماتدها جهت تجزیه دیواره سلولی، انواع مختلفی از آنزیمهای تجزیه کننده دیواره سلولی را ترشح میکنند. بتا- 1 و 4 اندوگلوکاناز از اولین آنزیمهای تجزیه کننده شناخته شده در این ارتباط است. در این پژوهش، فعالیت آنزیم مذکور در سه گونه شاملMeloidogyne incognita ،Pratylenchus loosi و Aphelenchoides besseyi مورد مطالعه قرار گرفت. ابتدا با انجام نمونه برداری، شناسایی، خالص سازی و تکثیر هر سه گونه نماتد، استخراجDNA انجام شد. سپس با استفاده از پرایمر دژنره اختصاصی و به کمک واکنش زنجیرهای پلیمراز، ژن کد کننده آنزیم بتا- ۱ و ۴ اندوگلوکاناز در نماتدهای مذکور تشخیص داده شد. استخراج RNA کل از هر سه گونه انجام شد. بعد از آن، cDNA تهیه و با استفاده از ژن مرجع، درستیcDNA ها مورد بررسی قرار گرفت. سپس شدت بیان ژن کد کننده آنزیم بتا- 1 و 4 اندوگلوکاناز برای نمونهها بررسی شد. نتایج نشان داد که ژن کدکننده آنزیم بتا- ۱ و ۴ اندوگلوکاناز، بیشترین فعالیت آنزیمی و شدت بیان را در نماتد مولد گره (M. incognita) داشت.نماتد مولد زخم ریشه چای (P. loosi) و نماتد نوک سفیدی برگ برنج (A. besseyi)به ترتیب در رتبههای بعدی قرار گرفتند.