بهینه‌سازی تولید آفت‌کش بیولوژیک Bacillus thuringiensis به روش تاگوچی

نویسندگان

1 دکتری، گروه گیاه‌پزشکی،واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.

2 کارشناس ارشد، موسسه تحقیقات گیاه‌پزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران.

3 دانشیار، موسسه تحقیقات گیاه‌پزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران.

4 استادیار، گروه حشره شناسی کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، ایران

doi
10.22092/bcpp.2023.362185.332
چکیده

پس از دست‌یابی به استرین‌های برتر Bt از لحاظ قدرت بیمارگری و دامنه میزبانی، تهیه محیط‌های کشت ارزان‌قیمت برای تولید اسپور و کریستال در فرمانتور آزمایشگاهی به‌عنوان مدل اولیه، و تولید انبوه آن در بیوراکتورهای با مقیاس صنعتی از اهمیت ویژه‏ای برخوردار است. در این تحقیق سعی شده است تا با استفاده از نهاده‌های ارزان قیمت مانند پسماندها و فرآورده‌های فرعی صنایع کشاورزی بستر غذایی مناسب و بهینه‌ای برای رشد Bt فراهم شود و میزان تولید این باکتری با استفاده از این مواد مورد ارزیابی قرار گیرد. در این تحقیق پسماندها و فرآورده‌های فرعی صنایع کشاورزی به عنوان محیط کشت غذایی به‌صورت عصاره و به‌‌صورت مایع برای تکثیر Bt kurstaki سویه بومی 6R مورد بررسی قرار گرفت محیط‌های کشت به‌صورت تلفیقی از دو و سه محیط کشت با درصدهای متفاوت مورد ارزیابی قرار گرفتند و فرایند بهینه‌سازی با روش تاگوچی و با استفاده از نرم‌افزار Qualitek–4 انجام شد. نتایج آزمایشات و تجزیه تحلیل داده‌ها نشان داد که در محیط‌های کشت دوتایی سبوس گندم (منبع کربن) همراه با شربت ذرت با CFU/ml3/44 ×1010 ، سبوس گندم(منبع کربن) همراه با پودر ماهی با CFU/ml 5/5 ×109  و محیط‌های ترکیب سه‌تایی شامل سویا، شربت ذرت، پودر ماهی CFU/ml 3/98×1016 ، سویا، شربت ذرت، ملاس نیشکر CFU/ml 9/89×1016  و سبوس گندم، شربت ذرت و ملاس چغندرقند CFU/ml 9/29×1016  بهترین محیط کشت‌هایی بودند که بیشترین میزان تولید باکتری Bt را در شرایط آزمایشگاه داشتند. نتایج نشان داد، Bt حاصل از بسترهای دوتایی سبوس گندم و پودرماهی، سبوس گندم و شربت ذرت و بسترهای سه‌تایی سویا، شربت ذرت و پودرماهی؛ شربت ذرت، سویا و ملاس نیشکر؛ شربت ذرت، سبوس گندم و ملاس چغندر قند روی لارو سن سه برگخوار مصری Spodoptera littoralis صد درصد تلفات داده است.