فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

بیماری بوته‌میری خیار از جمله عوامل محدود کننده کشت خیار که باعث خسارت قابل توجهی در گلخانه‌های تجاری می‌شود. به منظور شناسایی عوامل بیماری زا، نمونه‌برداری و جداسازی عامل بیماری طی سال‌های 1388 تا 1390 از گلخانه‌های تجاری خیار در رفسنجان انجام شد. تعداد 23 جدایه پیتیوم با استفاده از محیط کشت انتخابی جداسازی و بیماریزایی جدایه‌ها روی گیاهچه‌های خیار ارزیابی و اثبات گردید. شناسایی بیمارگر بر‌اساس ریخت شناسی پرگنه، ویژگی‌های میکروسکوپی و روش مولکولی انجام شد. بر اساس ویژگی‌های میکروسکوپی گونه P. aphanidermatumشناسایی گردید. توالی نوکلئوتیدی دی ان ای ناحیه ترانوبسی شونده داخلی ریبوزومی (rDNA-ITS) جدایه‌های انتخابی تعیین و به بانک ژن ارسال گردید.جستجوی تشابه با GenBank-BLAST با استفاده از توالی‌ ناحیه rDNA-ITS نشان داد کهP. aphanidermatumثبت شده در بانک ژن با شماره ثبت AB355599 شبیه‌ترین توالی (بیش از99درصد تشابه) به جدایه به‌دست آمده می‌باشد. شناسایی و ردیابی مولکولی P. aphanidermatum از بافت آلوده بر اساس تکثیر قطعه اختصاصی از ناحیه rDNA-ITS با استفاده از آغازگراختصاصی Paph54F/ITS2 انجام و اختصاصیت و حساسیت آغازگر بررسی شد. نتایج نشان داد که جفت آغازگر مزبور برای ردیابی بیمارگر P. aphanidermatum بسیار اختصاصی و قادر به تکثیر قطعه 200 جفت بازی می‌باشد. از طرفی قادر به ردیابی کمتر از fg200 از DNA خالص بیمارگر در PCR معمولی می‌باشد. استفاده از آغازگرطراحی شده زمینه ردیابی P. aphanidermatum از بافت، آلوده را فراهم ‌می‌نماید و هیچ باندی در تکثیر با DNA به‌دست آمده از بافت خیار سالم دیده نمی‌شود.