مطالعه الگوی پروتئوم آنزیمهای مؤثر در فرآیند مایکوپارازیتیسم جدایه جهشیافته قارچ Trichoderma harzianum
نویسندگان
1 گروه گیاهپزشکی، دانشکده تولیدات گیاهی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، ایران
2 گروه گیاهپزشکی، دانشکده تولیدات گیاهی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، ایران
3 گروه گیاهپزشکی، دانشکده تولیدات گیاهی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، ایران
4 گروهگیاهپزشکی، پژوهشکده کشاورزی هستهای، پژوهشگاه علوم و فنون هستهای، سازمان انرژی اتمی ایران
doi
10.22092/bcpp.2019.119556چکیده
این پژوهش بهمنظور بررسی الگوی بیان آنزیمهای کیتیناز در جدایههای جهشیافته قارچ Trichoderma harzianum، نسبت به جدایه وحشی انجام شد. ابتدا جدایههای گونه T. harzianum با دوز بهینه250 گری پرتوگاما، در معرض جهش قرار گرفتند. توان آنتاگونیستی جدایههای جهشیافته و وحشی با آزمون کشت متقابل در حضور بیمارگر گیاهیSclerotinia sclerotiorum مورد بررسی قرار گرفت. تمامی آنالیزهای آماری با نرمافزار SAS و آزمون حداقل اختلاف معنیدار (LSD) انجام شد. پروفایل پروتئینی آنزیمهای تولیدشده کلیه جدایهها با آزمون الکتروفورز SDS-PAGE و الگوی پروتئوم گونه وحشی بههمراه جدایه جهش یافته Th M8 با سوبسترای کیتین کلوئیدی و با استفاده از تکنیک الکتروفورز دوبعدی و نرمافزار ImageMaster 2D Platinum مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که اکثر جدایههای جهشیافته نسبت به جدایه وحشی در تولید آنزیمهای خارج سلولی کیتیناز، از نظر آماری در سطح پنج و یک درصد دارای اختلاف معنیدار بودند. همچنین نتایج آزمون آنتاگونیستی نشان داد، پتانسیل کنترل جدایههای جهشیافته نسبت به جدایه وحشی در مقابله با قارچ S. sclerotiorum بهطور معنیداری افزایش یافته است. بیشترین و کمترین بازدارندگی بهترتیب مربوط به جدایه Th M8 با 72 درصد و Th M3با 43 درصد بازدارندگی بود. از طرفی الگوی پروتئوم بر اساس تکنیک الکتروفورز دوبعدی نشان داد که لکههای پروتئینی جدایه جهشیافته در مقایسه با جدایه وحشی بهصورت کمّی و کیفی متفاوت هستند. این موضوع نشان میدهد که موتاسیون میتواند منجر به تغییر در الگوی بیان پروتئینهای مترشحه شود. بهطورکلی نتایج این مطالعه نشان داد که تکنیک پرتودهی گاما میتواند در تولید آنزیمهای مؤثر در مایکوپارازیتیسم و بهبود پتانسیل کنترل بیولوژیک در مدیریت بیماریهای گیاهی مؤثر واقع شود.