جدایه جدید Spiroplasma citri جدا شده از زنجرک Circulifer haematoceps در استان فارس
نویسندگان
1 نویسنده
2 نویسنده
3 نویسنده
4 نویسنده
doi
چکیده
جدایههای Spiroplasma citri براساس تحرک الکتروفورزی پروتئین و RFLP ژن اسپیرالین به پنج گروه تقسیم شدهاند (Foissac et al. 1996). در این گزارش دو جدایه جدید S. citri که واجدشرایط برای پایهگذاری گروه ششم هستند معرفی میگردد. پیش از این آلودگی S. citri در گیاه کنجد گزارش شده بود (Salehi and Izadpanah 2002). نمونههای زنجرک ناقل (Salehi et al.1993) آلوده بهS. citri از مناطق مختلف استان فارس جمعآوری شدند. حشرات ناقل آلوده (Circulifer haematoceps) جهت انتقال S. citri روی گیاه پروانش (Catharanthus roseus) نگهداری شدند. وجود آلودگی در نمونههای گیاهی جمع آوری شده از باغها و گیاهانی که توسط زنجرک ناقل و در شرایط گلخانه آلوده شده بودند با استفاده از آنتی سرم محلی که بر علیه جدایه S. citri تهیه شده بود تأیید شد. محیط LD10(Lee and Davis 1984) جهت جداسازی بیمارگر از نمونههای آلوده مورد استفاده قرار گرفت. واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از جفت آغازگر F1R1 (TAATTTTAATAACATTTGCTT3´,-´535-GTTCTAAATAAGAAAAAGTTT-) که ژن اسپیرالین را تکثیر میکند انجام شد. محصول PCR در باکتری E. coli همسانهسازی وتعیین ترادف گردید. آنالیز RFLP ژن اسپیرالین نشان داد که اکثر جدایههای S. ctri در گروه یک قرار میگیرند اما دو جدایه اسپیروپلاسما که از زنجرک Circulifer haematocepsاز مزارع کنجد جدا شده بودند با هیچ یک از این پنج گروه تطابق نداشتند. ژن اسپیرالین در هر دو جدایه (Acc. No. FJ755921 and FJ755922.) دارای 93 درصد همولوژی با جدایه GII3بود و توانایی رمزگذاری 244 آمینو اسید را داشت. این در حالی است که جدایههای گروه یک تا چهار تعداد 241 و جدایه گروه پنج 242 آمینو اسید را رمزگذاری میکنند. از طرف دیگر آنالیز RFLP ژن اسپیرالین نشان داد که این دو جدایه دارای یک جایگاه برشی اضافی با آنزیم MboIدر موقعیت نوکلئوتید شماره 456 به همراه تغییر در موقعیت دیگر جایگاههای برشی میباشد. این نتایج با الکتروفورز پروتئین در ژل آکریل آمید مورد تایید قرار گرفت. اندازه پروتئین اسپیرالین در این دو جدایه kDa8/22 بوددر حالی که اندازه این پروتئین در جدایه پالمیر kDa 32 و در جدایههای گروههای یک تا چهار kDa 5/28- 24 گزارش شده است. بنابراین با توجه به دادههای موجود (Foissac et al. 1996) این دو جدایه را میتوان در یک گروه جداگانه (گروه شش) قرار داد.