تغییرات بیان ژن سه گیرنده آدرنرژیک آلفا 1، 2 و بتا 2 در سلولهای کومولوس تخمدان زنان نابارور مبتلا به سندرم تخمدان پلیکیستیک (کاندید IVF) و تأثیر کلونیدین بر آن
نویسندگان
1 دانشیار مرکز تحقیقات بهداشت باروری ولیعصر (عج)، بیمارستان امام خمینی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران.
2 دانشجوی ارشد بیوشیمی، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.
3 دانشجوی دکترای ژنتیک، مرکز علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.
4 دکترای تولید مثل، مرکز تحقیقات بهداشت باروری ولیعصر (عج)، بیمارستان امام خمینی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران.
doi
10.22038/ijogi.2019.13576چکیده
مقدمه: عملکرد تخمدان توسط پیام یا سیگنالهای عصبی- هورمونی بهطور همزمان باید رشد فولیکولی، ترشح استروئید و اوولاسیون را کنترل نماید. گیرندههای آلفا و بتای سیستم سمپاتیک در تنظیم فعالیت سلولهای تکا و گرانولوزا جهت فولیکوژنزیس و استروئیدوژنزیس نقش دارند. مطالعه حاضر با هدف بررسی تغییرات بیان ژنهای سه گیرنده آدرنرژیک آلفا 1، 2 و بتا 2 در سلولهای کومولوس تخمدان زنان نابارور مبتلا به سندرم تخمدان پلیکیستیک (کاندید IVF) و تأثیر کلونیدین بر آن انجام شد. روشکار: این مطالعه مورد شاهدی در سال 1396 بر روی دو گروه کنترل (زنان سالم اهداء کننده تخمک) و مطالعه (مبتلایان به تخمدان پلیکیستیک) انجام شد. تجویز داروهای محرک تخمکگذاری در دو گروه جهت رشد تخمک تجویز شد. بعد از گرفتن تخمک یا عمل پانکچر، از مایع فولیکولی مجموعه کومولوس و تخمک جمعآوری شد و سلولهای کومولوس توسط آنزیم جدا و کشت داده شدند. سپس استخراج RNA از سلولهای کومولوس انجام و غلظت RNA مورد نظر با دستگاه Nano drop خوانده شد. cDNA سنتز و برای ژنهای ADRB2 و ADRα1,2 پرایمر طراحی و بیان ژن توسط تکنیک Real-time PCR سنجیده شد. در نهایت اثر داروی کلونیدین در سطح پروتئین ژنهای ADRβ2 و ADRα1,2 در سلولهای کومولوس دو گروه توسط تکنیک ایمونوسیتوشیمی (روش وسترن بلات) بررسی شد. یافتهها: نتایج این مطالعه افزایش سطح بیان ژن در زنان مبتلا به تخمدان پلی کیستیک نسبت به گروه کنترل و تأثیرگذاری کلونیدین بر بیان ژن را تأیید کرد. شدت این تأثیرگذاری بر بیان ژن گیرندهها بهترتیب ADRα2 < ADRβ2 < ADRα1 بود (02/0p<). نتیجهگیری: بر اساس نتایج بیان ژن و ایمونوسیتوشیمی، کلونیدین توانست بیان ژن سه گیرنده آدرنرژیک بهویژه آلفادو را بهطور معنیداری در بیماران کاهش دهد، لذا میتوان درمان فارماکوتراپی کلونیدین را پیشنهاد نمود.