فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

مقاله پژوهشی مقدمه: شمال شرق ایران به عنوان منطقه‌ی بومی ویروس HTLV-1 شناخته شده است. با توجه به افزایش شیوع بیماری‌های مرتبط با HTLV-1 در کشور، پیشگیری و دستیابی به درمان مؤثر ضروری می‌باشد. هدف از مطالعه‌ی حاضر، طراحی و تولید HTLV-1-پروتئاز متصل به قطعه Fcγ1 از آنتی‌بادی انسانی در سیستم بیانی مخمر پیکیا پاستوریس و استفاده آن در طراحی مهارکننده‌ی پروتئاز ویروس در مطالعات آینده می‌باشد. روش‌ها: پس از طراحی‌سازه ژنی HTLV-1 protease:hFcγ1، ژن بهینه شده آن در محل جایگاه‌های آنزیمی XhoI و NotI  و کتور بیانی pPICZαA وارد شد. ابتدا پلاسمید نوترکیب با روش کلرید کلسیم به باکتری E. coli TOP10F' و سپس با روش الکتروپوریشن به پیکیا پاستوریس GS115 الحاق شد. سویه‌های حاوی ژن نوترکیب بر روی محیط کشت حاوی آنتی‌بیوتیک زئوسین انتخاب و رشد داده شدند. در نهایت، به منظور تأیید بیان پروتئین نوترکیب، SDS-PAGE و وسترن بلات انجام شد. یافته‌ها: در مطالعه‌ی حاضر؛ طراحی، کلونینگ و بیان پروتئین نوترکیب HTLV-1 protease:hFcγ1 با استفاده از دو عنصر HTLV-1-پروتئاز و مولکول hFcγ1 انسانی در سیستم بیانی پیکیا پاستوریس انجام گردید. پروتئین نوترکیب HTLV-1 protease:hFcγ1 همودایمر بسیار گلیکوزیله با 3/8pI:  و kDa50 :Mw است. صحت الحاق سازه‌ی نوترکیب در وکتور بیانی pPICZαA با استفاده جفت پرایمرAOX1  و α-factor با تکثیر قطعات به اندازه‌های  bp1388 و  bp1687 تأیید شد. نتیجه‌گیری: نتایج حاصل از این پژوهش، می‌تواند راهکاری نوید بخش جهت بکارگیری پروتئین نوترکیب HTLV-1 protease:hFcγ1 در طراحی کاندیدای مناسب برای مهارکننده‌ی پروتئاز ویروس و درمان بیماری‌های وابسته به HTLV-1 باشد.