شناسایی کاندیدمی به روش آگلوتیناسیون با استفاده از نانوذرات طلا
نویسندگان
1 استاد، گروه قارچ و انگلشناسی، دانشکدهی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
2 دانشیار گروه قارچ و انگلشناسی، دانشکدهی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
3 دانشجوی کارشناسی ارشد قارچ شناسی پزشکی، گروه قارچ و انگلشناسی، دانشکدهی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
4 PhD انگلشناسی، سازمان انتقال خون شهرکرد، شهرکرد، شهرکرد، ایران
5 دانشجوی کارشناسی ارشد قارچشناسی پزشکی، گروه قارچ و انگلشناسی، دانشکدهی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، ایران
doi
10.48305/jims.v40.i668.0248چکیده
مقاله پژوهشیمقدمه: کاندیدمی عفونتی بسیار مهم از نظر ابتلا و مرگ و میر است و باید به سرعت تشخیص داده و درمان شود. هدف از این مطالعه، ارائهی یک روش ساده و سریع جهت تشخیص مستقیم مخمر کاندیدا در خون، با استفاده از آنتیبادی متصل به نانوذرات طلا به روش اگلوتیناسیون میباشد.روشها: در مطالعهی حاضر، 40 نمونه از BACTEC مثبت به لحاظ فونگمی تهیه شد. عوامل عفونی با استفاده از روشهای مرفولوژی و روش مولکولی PCR-RFLP تعیین گونه شدند. ابتدا از عوامل جدا شده از کاندیدمی مخلوطی از آنتیژن تهیه نموده و جهت تولید آنتیبادی به خرگوش سالم همراه با ادجوانت کامل تزریق شد. پس از تزریق چهار یادآور همراه با ادجوانت ناقص، نهایتاً از خرگوش خونگیری و سرم تهیه شد. تولید آنتیبادی و کارآیی آن به روش الایزا تأیید گردید و نانوذرات طلا به روش شیمیایی، به آنتیبادیها متصل شدند. روش نانوذره برای تشخیص سریع کاندیدمی، بر روی خون مستقیم از بیماران و خون آلوده شده به تعداد مشخص مخمر کاندیدا در محیط آزمایشگاه مورد بررسی قرار گرفت.یافتهها: کاندیدا آلبیکنس و پس از آن کاندیدا گلابراتا و کمپلکس کاندیدا پاراپسیلوزیس شایعترین عوامل کاندیدمی بودند. در تعیین cut off روش نانوذره، حداقل مخمر قابل شناسایی در خون بیمار، یک مخمر بود. حساسیت و ویژگی روش نانوذره برای شناسایی مخمر کاندیدا در خون چهار بیمار در مقایسه با کشت خون، 100 درصد محاسبه شد.نتیجهگیری: تحت شرایط آزمایشگاهی ما، اگر 15 میکرولیتر از خون فرد مشکوک به کاندیدمی که حاوی 1 مخمر یا حتی فقط آنتیژنهای کاندیدا باشد، در صورت مجاورت با 35 میکرولیتر از آنتیبادی کنژوگه شده با نانوذره، در کمتر از یک دقیقه آگلوتینه خواهد شد.