تولید سوسپانسیون سلولی از ارقام توتون شرقی (Nicotiana tabacum) به منظور تولید لاین سلولی

نویسندگان

1 دانشجوی کارشناسی‌ارشد گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران

2 دانشیار گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران

3 دانشیار گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران

4 دانشجوی دکتری گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران

doi
چکیده

کشت سوسپانسیون سلولی، تعلیقی از سلول‌های در حال رشد و تقسیم سریع می‌باشد که در محیط مایع کشت می‌شوند. سلول‌ها در سوسپانسیون سلولی از قدرت تقسیم بسیار بالاتری نسبت به کالوس‌ها برخوردار می‌باشند. این قابلیت سلول‌ها برای اهداف متنوعی مانند تولید لاین‌های سلولی، تولید متابولیت‌های ثانویه، بررسی مراحل چرخه سلولی، افزایش راندمان انتقال ژن و مطالعات تنش‌های زیستی و غیرزیستی مورد استفاده قرار می‌گیرد. در این بررسی، کالوس از بذور نه رقم از توتون‌‌های شرقی (.Nicotiana tabacum L) در محیط MS حاوی هورمون‌های NAA mg.l-1 1 و Kinetin mg.l-1 1 تهیه گردید. سپس میزان و کیفیت رشد در محیط‌های مختلف مورد آزمون قرار گرفت. بهترین میزان و کیفیت رشد برای ارقام OR-209،OR-205  و PDB 328 در محیط‌کشت LS‌ با تیمارهای هورمونی IAA mg.l-1 3، NAA mg.l-1 3 و Kinetin mg.l-1 1/0 به‌دست آمد. اثر انواع محیط‌های کشت و ترکیبات مختلف هورمونی بر روی سوسپانسیون سلولی حاصل نیز آزمون گردید. بهترین رشد مربوط به رقم OR-209 در محیط‌کشت LS مایع با همان تیمار هورمونی بود. در آخر، سوسپانسیون سلولی تولید شده از نظر سرعت رشد با لاین سلولی TBY-2 مقایسه گردید که مشابهت بسیار بالایی نشان داد. این نتیجه بیانگر امیدبخش بودن ارقام توتون شرقی برای تولید لاین‌های سلولی و بهره‌برداری از آن‌ها برای اهداف پژوهشی و کاربردی می‌باشد.