بهینهسازی تخلیص اسپورامین سیبزمینی شیرین [Ipomoea Batatas (L.) Lam] و بررسی اثر ضد تکثیری آن بر سلولهای سرطان پستان، ردهی MCF-7
نویسندگان
1 مرکز تحقیقات زیست فنآوری پزشکی، دانشکدهی پرستاری، مامایی و پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران
2 مربی، مرکز تحقیقات زیست فنآوری پزشکی، دانشکدهی پرستاری، مامایی و پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران
3 مرکز تحقیقات زیست فنآوری پزشکی، دانشکدهی پرستاری، مامایی و پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران
4 دانشیار، مرکز تحقیقات زیست فنآوری پزشکی، دانشکدهی پرستاری، مامایی و پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران
5 استادیار، مرکز تحقیقات زیست فنآوری پزشکی، دانشکدهی پرستاری، مامایی و پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران
doi
چکیده
مقدمه: از گذشته تا به امروز، یافتن درمانهایی با منشأ گیاهی و روش استخراج راحت و ارزان برای بیماریهایی نظیر سرطان مورد توجه بوده است. با توجه به این که پروتئازها در روند ایجاد و گسترش سلولهای سرطانی دخیل هستند، مهار کنندگان پروتئازی را میتوان به عنوان گزینهای برای درمان در نظر گرفت. اسپورامین، از جمله مهار کنندگان تریپسینی است که در ریشهی سیبزمینی شیرین وجود دارد. در این مطالعه، روش استخراج اسپورامین بهینه شد و برای اولین بار، اثر آن بر تکثیر سلولهای سرطان پستان ردهی Michigan cancer foundation-7 (MCF-7) بررسی گردید.روشها: عصارهی آبی از سیبزمینیهای شیرین استخراج شده، محلول شفاف شده وارد ستون کروماتوگرافی Diethylaminoethanol-Sepharose (DEAE-Sepharose) گردید. پس از شستشو با شیب نمکی پیوسته، بخشهای خالص شده جداسازی شدند. برای تأیید خلوص پروتئین استخراج شده از روش Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE-SSD) استفاده گردید. فعالیت مهاری اسپورامین خالص شده، با استفاده از روش Laskowaski-Takanara اندازهگیری گردید و در انتها از روش 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)، برای بررسی اثر ضد تکثیری اسپورامین استفاده گردید.یافتهها: تک باند 25 کیلودالتونی پس از انجام SDS-PAGE، نمایانگر اسپورامین بود. فعالیت مهاری آن نیز ۸۰۰ واحد مهاری در میلیگرم در دقیقه به دست آمد. نتایج روش MTT، میزان Inhibitory concentration50 (IC50) برای ۲۴ و ۴۸ ساعت دارای تفاوت معنیداری بود (010/0 > P).نتیجهگیری: روش تک ستونی تعویض یونی و شیب نمکی پیوسته برای خالصسازی اسپورامین موفقیتآمیز بود و با توجه به اثر ضد تکثیری آن بر روی سلولهای MCF-7، امید است بتوان در آینده از این روش برای تخلیص و استفاده در درمان بهره برد.