مقایسهی اثر دو داروی سرکوبگر ایمنی بر بیان فاکتورFoxp3+ در آزمایشگاه، پس از تحریک سلولهای T بکر CD4+
نویسندگان
1 استادیار، گروه ایمنیشناسی، دانشکدهی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
2 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه ایمنیشناسی، دانشکدهی پزشکی و کمیتهی تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
3 استادیار، مرکز تحقیقات ایمونولوژی سلولی و مولکولی، دانشکدهی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
4 دانشجوی دکتری، گروه ایمنیشناسی، دانشکدهی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
doi
چکیده
مقدمه: در بدن انسان، سلولهای لنفوسیت T تنظیمی (Treg) در کنترل بیماریهای خودایمن و ساماندهی به پاسخهای ایمنی در پیوند، سرطان و عفونتها شرکت میکنند. سیلیمارین یک کمپلکس فلاونولیگنان برگرفته از گیاه خار مریم (Milk thistle) با نام علمی Silybum marianum است و دارای اثرات ضد التهابی، آنتیاکسیدانی، محافظت کبدی (Hepatoprotective) و تعدیل سیستم ایمنی (Immunomodulatory) میباشد. در میان داروهای سرکوب کنندهی سیستم ایمنی، راپامایسین میتواند mTOR (Mammalian target of rapamycin) را مهار کرده، باعث بیان Foxp3، تکثیر Tregs و مهار سایر سلولهای T گردد. در این تحقیق، به مقایسهی اثر سیلیمارین با راپامایسین بر تولید سلولهای CD4+Foxp3+ در خون محیطی پرداختیم.روشها: سلولهای تکهستهای خون محیطی (Peripheral blood mononuclear cell یا PBMC) با استفاده از فایکول، از خون هپارینهی داوطلبان سالم جدا شد. سپس، سلولهای CD4+ بکر از سلولهای تکهستهای خون محیطی، با استفاده از ستون آهنربای ایمنی، خالصسازی گردید. سلولهایT بکر CD4+ با آنتیبادیهای مونوکلونال Anti-CD3 و Anti-CD28 در محیط 1640-RPMI(Sigma) (Roswell Park Memorial Institute) برای مدت 18 ساعت فعال شدند و کشت آنها در حضور سیلیمارین یا کنترلش، DMSO (Dimethyl sulfoxide) یا در حضور یا عدم حضور راپامایسین و با اضافه کردن اینترلوکین 2 (IL-2) به مدت 3 روزانجام شد؛ سپس، درصد سلولهای TCD4+Foxp3+ از طریق رنگآمیزی با آنتیبادیهای نشاندار و بررسی آنها توسط فلوسایتومتری انجام پذیرفت.یافتهها: سیلیمارین در مقایسه با کنترلش، DMSO، همچنین، راپامایسین، باعث افزایش تولید سلولهای TCD4+Foxp3+ در کشت سه روزهی لنفوسیتهای T بکر خون محیطی شد (05/0 > P)؛ در حالی که راپامایسین، در مقایسه با کنترلش (محیط RPMI) افزایشی در تولید سلولهای TCD4+Foxp3+ در کشت سه روزه نشان نداد (05/0 < P).نتیجهگیری: با توجه به اهمیت جایگزینی داروهای کم ضررتر و نقش سلولهای Treg در تنظیم و ساماندهی سیستم ایمنی، سیلیمارین به عنوان داروی تولیدکنندهی Treg میتواند در درمان بیماریهای خودایمنی و یا حتی در پیوند اعضا مورد استفاده قرار گیرد.