بررسی میزان بیان ژن Cbfa1 طی تمایز استئوژنیک سلول‌های بنیادی مشتق از بافت چربی

نویسندگان

1 دانشجوی دکتری، گروه آمار زیستی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران

2 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه آناتومی و بیولوژی ملکولی، دانشکده‌ی پزشکی و کمیته‌ی تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

3 دانشجوی دکتری، گروه ژنتیک پزشکی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران

4 عضو هیأت علمی، جهاد دانشگاهی استان مرکزی، اراک، ایران

5 استادیار، گروه آناتومی و بیولوژی ملکولی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

6 دانشیار، گروه آناتومی و بیولوژی ملکولی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

doi
چکیده

مقدمه: بافت استخوان توانایی رشد و ترمیم را دارا می‌باشد، اما این توانایی با افزایش وسعت صدمات استخوان محدود می‌شود. تاکنون، روش‌های جایگزینی موجود هر یک دارای معایبی بوده است. به تازگی، سلول‌های بنیادی مزانشیمی به خاطر کاربرد در مهندسی بافت استخوان از اهمیت بالایی برخوردار شده‌اند. این سلول‌ها توانایی تمایز به استئوبلاست سلول‌های اصلی استخوان را دارا می‌باشند. ژن Cbfa1 (Core binding factor alpha 1) یکی از اصلی‌ترین ژن‌های دخیل در استخوان‌زایی است. در این مطالعه، به بررسی روند بیان ژن Cbfa1 طی دوره‌ی تمایزی استئوژنیک پرداختیم تا اثر تغییرات آن را روی تمایز این سلول‌ها تعیین کنیم.روش‌ها: پس از نمونه گیری و جداسازی سلول‌های بنیادی مزانشیمی از بافت چربی، کشت این سلول‌ها انجام شد. پس از پاساژ سوم، تمایز استئوژنیک این سلول‌ها به انجام رسید و سلول‌ها به مدت 7، 14، 21 و 28 روز در محیط تمایزی کشت داده شدند. تصدیق تمایز با استفاده از رنگ آمیزی von Kossa صورت پذیرفت. پس از به دست آوردن سلول‌ها، تخلیص RNA تام سلولی و ساخت cDNA، با استفاده از روش Real-time PCR، میزان بیان ژن Cbfa1 در استئوبلاست‌های حاصل از تمایز استئوژنیک مشخص گردید.یافته‌ها: افزایش قابل توجهی در بیان ژن Cbfa1 در طی دوره‌ی تمایزی از روز 7 تا روز 28 در استئوبلاست‌های تمایز یافته از سلول‌های بنیادی مزانشیمی دیده شد.نتیجه‌گیری: به نظر می‌رسد، با بیشتر قرار گرفتن سلول‌های بنیادی مزانشیمی در محیط استئوژنیک، این سلول‌ها شباهت بیشتری به سلول‌های استئوبلاست طبیعی از نظر بیان ژن Cbfa1 پیدا خواهند کرد؛ هر چند، این میزان بیان کمتر از بیان ژن Cbfa1 در استئوبلاست‌های طبیعی می‌باشد.