مقایسهی روشهای کشت و PCR برای تشخیص اختصاصی سودوموناس آئروژینوزا و فراوانی درصد مقاومت به آنتیبیوتیکها بر روی نمونههای بالینی
نویسندگان
1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه میکروب شناسی، دانشکدهی علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی مرکزی، واحد علوم و تحقیقات مرکزی، اراک، ایران
2 کارشناس ارشد، گروه میکروبشناسی، بیمارستان حضرت ولی عصر(عج)، دانشگاه علوم پزشکی زنجان، زنجان، ایران
3 استادیار، گروه بیوتکنولوژی، دانشکدهی داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی زنجان، زنجان، ایران
4 پزشک عمومی، گروه کنترل و پیشگیری بیماریها، معاونت بهداشتی استان زنجان، دانشگاه علوم پزشکی زنجان، زنجان، ایران
doi
چکیده
مقدمه: سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن فرصتطلب بیمارستانی مهم گرم منفی است. به دلیل داشتن مقاومت ذاتی و اکتسابی به آنتیبیوتیکهای متعدد، نامطلوب شناخته شده است. روشهای متفاوتی در آزمایشگاه بالینی برای تشخیص سودوموناس آئروژینوزا اعمال میشود. هدف از این مطالعه، مقایسهی روشهای فنوتیپی و تکنیک واکنش زنجیرهای پلیمراز (Polymerase chain reaction یا PCR) برای شناسایی سودوموناس آئروژینوزا و فراوانی درصد مقاومت به آنتیبیوتیکها بر روی نمونههای بالینی بیماران بستری در بیمارستان ولی عصر (عج) زنجان بود. روشها: در این مطالعه، 70 سویهی سودوموناس آئروژینوزا که از نمونههای بالینی متفاوت جدا شده بودند، به کار گرفته شد و وجود سودوموناس آئروژینوزا به واسطهی قرار گرفتن روی محیط کشت ترکیبی (مولر هینتون آگار، بلاد آگار و مکانکی آگار) و همچنین انجام تستهای بیوشیمیایی پایه مورد بررسی قرار گرفت. پس از کشت، آنتیبیوگرام به روش Kirby-Bauer در کنار آنتیبیوتیکهای مختلف انجام شد. سپس DNA ژنومیک باکتری استخراج شده و توالی هدف مورد نظر به نام ژن اگزوتوکسین A تکثیر یافت. یافتهها: در کل 300 ایزوله در این مطالعه آنالیز شد که 70 ایزوله به وسیلهی تستهای فنوتیپی به عنوان سودوموناس آئروژینوزا شناسایی شده است. ژن ETA (Exotoxin A) در 66 ایزولهی آن از طریق PCR برای پرایمرهای اختصاصی ژن اگزوتوکسین A مثبت بودند. بیشترین میزان مقاومت نسبت به آنتیبیوتیکهای مروپنم، سفوتاکسیم و سفتازیدیم و کمترین مقاومت نسبت به آنتیبیوتیکهای سیپروفلوکساسین یا پیپراسیلین بود. نتیجهگیری: این نتایج نشانگر آن است که روش PCR ذکر شده در بالا میتواند تشخیصی با حساسیت بالا، آسان، سریع و اختصاصی برای سودوموناس آئروژینوزا در نمونههای بالینی فراهم کند. همچنین دقت در انتخاب آنتیبیوتیک مناسب برای درمان، از ایجاد سویههای مقاوم جلوگیری خواهد نمود. واژگان کلیدی: سودوموناس آئروژینوزا، PCR، اگزوتوکسین A