بررسی ژنهای ویرولانس و مقاومت آنتیبیوتیکی سویههای انتروهموراژیک اشریشیا کلی در نمونههای همبرگر دست ساز با روش Multiplex PCR در شهرستان شیراز
نویسندگان
1 کارشناسی ارشد، گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد مرودشت، مرودشت، ایران
2 دانشیار، گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد جهرم، جهرم، ایران
3 کارشناسی ارشد، گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد جهرم، جهرم، ایران
doi
چکیده
مقدمه: اشریشیا کلی O157:H7 یکی از عوامل اصلی ایجاد کنندهی بیماریهای منتقل شونده به وسیلهی مواد غذایی در انسان است که بیماریهایی مانند کولیت هموراژیک و سندرم اورمی همولیتیک را ایجاد میکند. به دلیل انتقال این باکتری از طریق مواد غذایی به ویژه همبرگر به آن باکتری همبرگر میگویند. هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی مارکرهای بیماریزای سویههای اشریشیاکلی O157:H7 از نمونههای همبرگر در شهرستان شیراز بود.روشها: این پژوهش به صورت مقطعی و توصیفی بر روی320 نمونهی همبرگر جمعآوری شده از چهار منطقهی شیراز انجام شد. نمونهها پس از غنی سازی در محیط TSB واجد نووبیوسین در دمای 37 درجهی سانتیگراد مورد بررسی قرار گرفتند. سپس از محیط CT-SMAC و VRBA به منظور بررسی تخمیر سوربیتول و لاکتوز و از محیط کروموآگار برای بررسی فعالیت بتاگلوکورونیدازی باکتریهای جدا شده استفاده شد. با استفاده از آنتی سرم اختصاصی، وجود باکتری اشریشیاکلی O157 تأیید گردید. در نهایت وجود ژنهای بیماریزا با استفاده از Multiplex PCR و مقاومت آنتیبیوتیکی سویهها با روش دیسک دیفیوژن بررسی شد.یافتهها: از مجموع نمونههای مورد بررسی 259 باکتری سوربیتول منفی (93/80 درصد) جداسازی گردید که از این تعداد 227 باکتری (64/87 درصد) توانایی تخمیر لاکتوز را داشتند. سپس به کمک روشهای بیوشیمیایی 192 نمونه (58/84 درصد) به عنوان اشریشیا کلی شناسایی شدند. همچنین میزان جداسازی اشریشیا کلی MUG منفی (50 درصد) و اشریشیا کلی O157 (43/3 درصد) بود. با ارزیابی مارکرهای بیماریزایی، در 3 نمونه ژنهای stx1 و eae، در یک نمونه ژنهای stx1، eae و stx2و در یک نمونه تنها ژن hly شناسایی شد. تمامی سویههای جدا شده به اکثر آنتیبیوتیکها مقاوم بودند.نتیجهگیری: به دلیل شدت بیماریزایی این باکتری و انتقال آن توسط مواد غذایی خام به ویژه همبرگر، انجام مطالعات بیشتر بر روی سایر مواد غذایی گوشتی پیشنهاد میگردد.